[发明专利]一种基于磁珠与超声分离发光标记物的核酸检测方法有效
申请号: | 201410757736.3 | 申请日: | 2014-12-11 |
公开(公告)号: | CN104498602A | 公开(公告)日: | 2015-04-08 |
发明(设计)人: | 李智洋;杨淏文;何农跃 | 申请(专利权)人: | 南京医科大学第二附属医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 南京知识律师事务所32207 | 代理人: | 卢亚丽 |
地址: | 210011江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种基于磁珠与超声分离发光标记物的核酸检测方法:该方法是在磁珠表面修饰功能化手臂分子;设计用于检测靶核酸片段的功能化探针,将功能化探针修饰于结合有功能化手臂分子的磁珠表面;通过杂交将靶核酸片段及其发光标记物捕获至磁珠表面;磁分离,清洗,得到已获取发光标记物的磁珠;通过超声波处理等物理方法将发光标记物从磁珠表面分离下来,对不含磁珠的发光标记物溶液进行发光检测,获取靶核酸信息。本发明不仅能克服磁珠对发光信号的遮蔽效应导致的发光信号损失,而且使用超声波处理等物理方式,可以避免化学或生物方法可能导致的试剂失活或其他干扰,在20μL体积中能够检测出最少50amol核酸片段,检测灵敏度高。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 超声 分离 发光 标记 核酸 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种基于磁珠与超声分离发光标记物的核酸检测方法,其特征在于包括以下步骤:(1)在磁珠表面修饰适合连接核酸探针的功能化手臂分子;(2)设计用于检测靶核酸片段的功能化探针,将功能化探针修饰于结合有功能化手臂分子的磁珠表面;(3)通过杂交,将靶核酸片段及其发光标记物捕获至磁珠表面;(4)磁分离,清洗,即得到已获取发光标记物的磁珠;(5)通过超声波处理等物理方法将发光标记物从磁珠表面分离下来,即得到不含磁珠的发光标记物溶液;(6)对该溶液进行发光检测,即可获取靶核酸信息。
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