[发明专利]蒿属植物中单体奇蒿黄酮的提取方法及其在制备抑制金黄色葡萄球菌药物中的应用

摘要

本发明涉及蒿属植物中单体奇蒿黄酮的提取方法及其在制备抑制金黄色葡萄球菌药物中的应用，属于天然植物提取及应用技术领域。该提取物为奇蒿中的特有的黄酮类化合物。所述奇蒿提取物奇蒿黄酮经如下步骤制得：将中药奇蒿粉碎，用70％乙醇加热回流提取，将提取物经减压浓缩，得到粗提物。粗提取经硅胶柱层析，凝胶柱色谱，反相制备高效液相法制得纯度为99％的奇蒿黄酮。本发明所述奇蒿提取物奇蒿黄酮的提取方法简单，所得奇蒿提取物经体外细胞实验证明：具有较强的抗临床型金黄色葡萄球菌，可用于制备金黄色葡萄球菌的药物。

主权项

1.蒿属植物中单体奇蒿黄酮的提取方法，按照下述步骤进行：A、制备总粗提物将中药奇蒿粉碎，取奇蒿粉末10～50kg，加入70％的乙醇水溶液100～500L，加热70℃回流提取2h，将提取液减压浓缩，得总粗提取物；B、分离纯化将步骤A制得的总粗提取物加水溶解，使其混悬，得提取物混悬液，加入石油醚萃取三次，弃去三次石油醚萃取液，得到经石油醚萃取后的提取物混悬液；再向经石油醚萃取后的提取物混悬液中加入氯仿萃取三次，合并三次萃取液，减压回收溶剂得氯仿部位浸膏；将氯仿部位浸膏上硅胶柱色谱，用石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸系统以8:2:1:0.1、6:2:1:0.1、4:2:1:0.1、2:2:1:0.1、1:1:1:0.1进行梯度洗脱，每个梯度20L，流速为3滴/秒，各流分接样体积1L，通过薄层层析法对各流分进行点样，合并相同极性的流分，按极性差别从小到大共得到7个部分洗脱液Fr1～Fr7，其中Fr5部分为2:2:1:0.1洗脱部分流分，该流分在极性为1:2:1:0.1的石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸展开剂系统中，Rf值为0.4～0.6的流分合并所得；Fr5用Sephadex G-20凝胶柱色谱分离，用氯仿：甲醇＝1:1溶液2L等度洗脱，流速为6秒/滴，每份样品接100ml，分别得组分Fr5a～Fr5n，经薄层层析点样法，将含有奇蒿黄酮样品组分Fr5g～Fr5j合并到Fr5g；合并后的Fr5g用反相高效液相制备，制备条件为色谱柱Kromasil C18，250mm×21.2mmi.d.；5μm；流动相比例为乙腈：0.2％甲酸水＝52:48，流速20ml/min，柱温25℃，检测波长250nm，根据检测器谱图上显示，时间段在41min到46min内接收流分，得到奇蒿黄酮5,7-二羟基-6,3′,4′,5′-四甲氧基黄酮。