[发明专利]一种用于微纳颗粒对细胞影响实验的微反应器的制备方法有效
申请号: | 201410767863.1 | 申请日: | 2014-12-12 |
公开(公告)号: | CN104498471A | 公开(公告)日: | 2015-04-08 |
发明(设计)人: | 屈树新;刘玉梅;匙峰;高雪玲;刘阳;翁杰 | 申请(专利权)人: | 西南交通大学 |
主分类号: | C12N11/12 | 分类号: | C12N11/12;C12N11/10;C12N11/08;C12N11/04;C12Q1/02 |
代理公司: | 成都博通专利事务所51208 | 代理人: | 陈树明 |
地址: | 610031四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 一种用于微纳颗粒对细胞影响实验的微反应器的制备方法,步骤是:(A)将细胞、微纳颗粒充分混匀于聚阴离子等渗溶液中形成混合液;(B)用静电微注射仪将混合液滴入盛有二价阳离子等渗溶液的收集池,得到包裹细胞和微纳颗粒的凝胶微球;(C)将B步的凝胶微球投入聚阳离子等渗溶液中,形成一层聚阳离子包覆膜;随后投入聚阴离子等渗溶液中振荡再形成一层聚阴离子包覆膜;重复操作0-3次,得到具有2-8层包覆膜的凝胶微球;(D)将(C)步的凝胶微球投入二价阳离子的等渗置换液,即获得用于微纳颗粒对细胞影响实验的微反应器。该微反应器使细胞-微纳颗粒充分接触,细胞、微纳颗粒的计量准确,能更准确、可靠地反映微纳颗粒对细胞的影响作用关系。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 颗粒 细胞 影响 实验 反应器 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种用于微纳颗粒对细胞影响实验的微反应器的制备方法,包括以下步骤:(A)预处理:将106‑109个实验用细胞和0.1‑2.0g微纳颗粒充分混匀于5‑50mL的1.0‑5.0wt.%的聚阴离子等渗溶液中形成粘稠混合液;(B)凝胶体系构建:采用静电微注射仪将A步的粘稠混合液滴入盛有20‑200mL的0.5‑10.0wt.%二价阳离子等渗溶液的收集池;静置5‑20min后,过滤除去上清液并用生理盐水洗涤得到包裹细胞和微纳颗粒的凝胶微球;(C)络和成膜:将凝胶微球投入0.1‑1.5wt.%的聚阳离子等渗溶液中,振荡5‑15min;聚阳离子在凝胶微球表面形成一层聚阳离子包覆膜;静置后,过滤除去上清液并用生理盐水洗涤;随后投入0.1‑0.5wt.%的聚阴离子等渗溶液中振荡5‑15min,再在凝胶微球表面形成一层聚阴离子包覆膜;静置后,弃去上清液并用生理盐水洗涤;重复以上操作0‑3次,得到具有2‑8层包覆膜的凝胶微球;(D)液化反应:将C步得到的具有2‑8层包覆膜的凝胶微球投入二价阳离子的等渗置换液中振荡0.5‑5min,等渗置换液的浓度为0.5‑10.0wt.%,使凝胶微球中的二价阳离子被置换,聚阴离子与二价阳离子的交联结构破坏,静置后除去上清液并用生理盐水洗涤,即获得包裹细胞和微纳颗粒的、用于微纳颗粒对细胞影响实验的微反应器。
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