[发明专利]一种基于微流控芯片的快速多通量提取血液样本DNA的方法有效
申请号: | 201410768138.6 | 申请日: | 2014-12-11 |
公开(公告)号: | CN105734045B | 公开(公告)日: | 2019-02-01 |
发明(设计)人: | 秦建华;苏文涛;姜雷;李艳峰 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 | 代理人: | 张晨 |
地址: | 116023 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明提供了一种基于微流控芯片的快速多通量提取血液样本DNA的方法。所述微流控芯片为4层膜结构,分别为液路层、气路控制层、和磁铁控制层和玻璃基底层四部分;所述气体控制层位于液路层下方,所述基底层位于气体控制层下方;所述磁铁控制层位于基底层下方。该方法以微泵阀控制的微流控芯片为平台,利用微泵阀控制进气和抽气,从而实现血液样品、磁珠、清洗液和洗脱液的引入、混合,非DNA杂质的清洗直至DNA收集过程。该方法将血液样品DNA纯化的全过程集中到单个芯片上进行。另外,该方法具有快速、多通量、无人工操作等优势。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 微流控 芯片 快速 通量 提取 血液 样本 dna 方法 | ||
【主权项】:
1.一种基于微流控芯片的快速多通量提取血液样本DNA的方法,其特征在于,采用微流控芯片,按照以下步骤进行:(A)引入血液样本;(B)引入用于DNA纯化的超顺硅珠;(C)通入细胞裂解液对引入的细胞样品进行裂解,得到含核酸物质的细胞裂解液;(D)从细胞裂解液中提取纯化DNA;所述微流控芯片,利用集成有气动泵阀的微流控芯片作为平台,通过操作气动微阀控制下述内容之一或其组合:样品的引入、样品的混合及核酸样品的收集;所述微流控芯片为4层膜结构,分别为液路层、气路控制层、和磁铁控制层和玻璃基底层四部分;所述气路控制层位于液路层下方,所述基底层位于气路控制层下方;所述磁铁控制层位于基底层下方;所述液路层包括上样缓冲液、磁珠、清洗液、DNA洗脱液入口,液体通道,流通池,样品池,储液池,储样池,DNA收集池,废液池,加入样品池的样品进入储样池;加入上样缓冲液、磁珠、清洗液、DNA洗脱液入口的液体在流通池产生的负压下,经液体通道进入储液池,与储样池的样品混合进入DNA收集池,废液池收集每一步产生的多余液体;所述的气路控制层含有14个气阀,所述气阀由进气口、气体通道、气动微阀构成;气动微阀分别位于液体通道和储液池下方通过气动微阀控制液体通道的开关;所述的磁铁控制层含有磁铁放置区域,磁铁放置区域的位置与储液池和储样池相对应;所述的气动微阀由液路层1a和气路控制层1b之间的PDMS薄膜构成;液路层1a和气路控制层1b之间只通过气动微阀相联系,二者内部并不连通;所述的14个气阀,具体分布和描述如下:1#气阀,2#气阀,3#气阀,4#气阀和6#气阀具1个呈细长方形的气动微阀,1#气阀,2#气阀,3#气阀,4#气阀的气动微阀位于上样缓冲液、磁珠、清洗液、DNA洗脱液入口的液体通道下方、6#气阀的气动微阀位于流通池的液体通道下方,控制相应液体通道开关;7#气阀,8#气阀,10#气阀,12#气阀,13#气阀,14#气阀具4个呈细长方形的气动微阀,气动微阀分别位于四个混合区域的液体通道下方,可同时控制四个混合区域的液体通道开关,其中7#气阀控制进入储液池前的液体通道,8#气阀控制样品池至储样池之间的液体通道,10#气阀控制储液池至储样池之间的液体通道,12#气阀控制储样池至DNA收集池之间的液体通道,13#气阀控制储液池至废液池之间的液体通道,14#气阀控制储样池至废液池之间的液体通道;5#气阀具1个呈圆形的气动微阀,位于流通池的下方,产生负压提供液体在液体通道中流动的动力;9#气阀和11#气阀具4个呈正方形的气动微阀,气动微阀分别位于四个混合区域储液池、储样池的下方,控制液体进出储液池和储样池。
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