[发明专利]利用交叉引物和双探针恒温扩增检测NOS终止子的方法

摘要

本发明公开了属于转基因产品检测领域的用于交叉引物和双探针恒温扩增检测NOS终止子的引物组。所述的引物组由SEQ ID No：1～SEQ ID No：5所示的一对外围引物、一个交叉引物和一对检测探针引物组成。本发明还公开了含有该引物组的试剂盒，以及利用交叉引物和双探针恒温扩增检测NOS终止子的方法，利用本发明的引物组进行恒温扩增反应后，再用核酸试纸条对检测结果进行判读。本发明引物组特异性强，灵敏度高；其次，检测速度快，检测时间短，检测时间缩短到100min，明显提高了检测效率；此外，本发明方法简单实用，不需要复杂仪器设备，尤其适用在基层现场检测。

主权项

用于交叉引物和双探针恒温扩增检测NOS终止子的引物组，其特征在于由一对外围引物、一个交叉引物和一对检测探针引物组成；其中所述的一对外围引物为：正向外围引物NOS4s：5’‑TTATCCTAGTTTGCGCGCTA‑3’(SEQ ID No:1)，反向外围引物NOS5a：5’‑GAATCCTGTTGCCGGTCTTG‑3’(SEQ ID No:2)；所述的交叉引物NOS2a1s：5’‑GTTTATGAGATGGGTTTTTTTTGTTTTCTATCGTGTATTA‑3’(SEQ ID No:3)；所述一对检测探针引物为：检测探针NOS2a*：5’‑GTTTATGAGATGGGTTTTT‑3’(SEQ ID No:4)检测探针NOS3a*：5’‑TTAGAGTCCCGCAATTATACA‑3’(SEQ ID No:5)；其中检测探针NOS2a*的5’端标记修饰生物素；检测探针NOS3a*的5’端标记修饰荧光素FAM。