[发明专利]一种抑菌的几丁质酶解方法在审
申请号: | 201410785605.6 | 申请日: | 2014-12-18 |
公开(公告)号: | CN104531639A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 陈可泉;高聪;张阿磊;何珣;欧阳平凯 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12P19/26;C12R1/01 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 李纪昌;曹翠珍 |
地址: | 211816 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 一种抑菌的几丁质酶解方法,包括以下步骤:步骤1,微生物发酵产几丁质酶。以产几丁质酶微生物为供试菌,发酵生产几丁质酶,发酵结束后,获得几丁质酶粗酶液,经提纯、透析、浓缩后获得几丁质降解酶;步骤2,酶解几丁质。将几丁质降解酶置于反应釜内,依次加入几丁质粉末、金属离子激活剂、辅助酶制剂和有机试剂,恒温加热并搅拌,待几丁质粉末完全被降解得酶解液;步骤3,产品的回收。离心酶解液,得双相体系,其中上层体系为有机系,下层为水系,用吸附树脂吸附、洗脱,收集洗脱液经处理后获得产品。本发明原料可实现重复利用,转化过程无菌,降低能耗的同时获得高产率,且降解产物生物活性良好,具有显著的经济效益。 | ||
搜索关键词: | 一种 几丁质 方法 | ||
【主权项】:
一种抑菌的几丁质酶解方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1,微生物发酵产几丁质酶以产几丁质酶微生物为供试菌,将供试菌接种到种子培养基上,在37℃,200 rpm,初始pH为6 ~ 8的条件下培养,得种子液,再将种子液接种到装有产酶发酵培养基的发酵罐中,在30℃,200 rpm,初始pH为6 ~ 8,通气量1vvm的条件下发酵,获得几丁质酶粗酶液,经提纯、透析、浓缩后获得几丁质降解酶;步骤2,酶解几丁质将几丁质降解酶置于反应釜内,依次加入几丁质粉末、金属离子激活剂、辅助酶制剂和有机试剂,恒温加热并搅拌,待几丁质粉末完全被降解,得酶解液;步骤3,产品的回收离心酶解液,得双相体系,其中上层体系为有机系,下层为水系,下层水系用吸附树脂吸附、洗脱,收集洗脱液经低温浓缩、醇洗、结晶、干燥后获得产品。
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