[发明专利]一种ABO正反定型及RhD血型检测卡

摘要

本发明涉及一种ABO正反定型及RhD血型检测卡，包括含有六个微柱的检测卡，所述六个微柱中前三个微柱分别装有等量的抗A凝胶、抗B凝胶和抗D凝胶，其余三个微柱装有等量的空白凝胶，其通过以下方法制备而成：葡聚糖凝胶的溶胀、制备各抗体稀释液、制备各抗体工作液、凝胶洗涤、分装形成Rh血型检测卡。本发明采用不同大小、不同筛分范围的交联葡聚糖凝胶进行混合，并用纯化水进行溶胀，有效地保证特异性的同时还拥有很高的灵敏度，并有效保证了体系的离子强度。

主权项

一种ABO正反定型及RhD血型检测卡，包括含有六个微柱的检测卡，其特征在于：所述六个微柱中前三个微柱分别装有等量的抗A凝胶、抗B凝胶和抗D凝胶，其余三个微柱装有等量的空白凝胶，其通过以下方法制备而成：（1）葡聚糖凝胶的溶胀：选用至少两种交联葡聚糖凝胶进行混合，然后加入纯化水中进行充分悬浮溶胀，再用纯化水洗涤去除破碎颗粒，得到大小均匀、呈完整球形的葡聚糖凝胶颗粒；（2）制备各抗体稀释液：抗A稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐10‑15g/L、牛血清白蛋白20‑25g/L、蔗糖15‑20g/L，稀释液的pH值为6.6‑6.8；抗B稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐15‑20g/L、牛血清白蛋白15‑20g/L、蔗糖25‑30g/L，稀释液的pH值为6.6‑6.8；抗D稀释液：以磷酸盐缓冲液为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐10‑15g/L、牛血清白蛋白35‑40g/L，稀释液的pH值为6.6‑6.8；空白凝胶洗涤缓冲液：以纯化水为溶剂，缓冲液中含有氯化钠1.75g‑2.07g/L、磷酸氢二钠0.185‑0.219g/L、磷酸二氢钠0.203‑0.24g/L、甘氨酸18‑21g/L；并调节 pH值为6.6‑6.8；（3）制备各抗体工作液：取抗A单克隆抗体浓缩液与抗A稀释液进行混合，使得到的抗A单克隆抗体工作液的效价≥128；取抗B单克隆抗体浓缩液与抗B稀释液进行混合，使得到的抗B单克隆抗体工作液的效价≥128；取抗D单克隆抗体浓缩液与抗D稀释液进行混合，使得到的抗D单克隆抗体工作液的效价≥64；（4）凝胶洗涤：取六份等量的葡聚糖凝胶颗粒，其中三份分别用等量的抗A稀释液、抗B稀释液和抗D稀释液进行洗涤至少三次，再加入相对应的抗A单克隆抗体工作液、抗B单克隆抗体工作液和抗D单克隆抗体工作液进行混合，得到抗A凝胶、抗B凝胶和抗D凝胶；再将另外三份葡聚糖凝胶颗粒分别用等量的空白凝胶洗涤缓冲液进行洗涤至少三次，再加入空白凝胶洗涤缓冲液进行混合，得到三份空白凝胶；（5）分装：按照每管24‑32微升的量，将抗A凝胶、抗B凝胶、抗D凝胶依次加到空白检测卡的前三个微柱中，将三份空白凝胶分别加到空白检测卡的后三个微柱中，形成ABO正反定型及RhD血型检测卡。