[发明专利]一种农杆菌介导的诸葛菜转基因方法在审
| 申请号： | 201410808312.5 | 申请日： | 2014-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN104818294A | 公开（公告）日： | 2015-08-05 |
| 发明（设计）人： | 孙小芹;杭悦宇;张艳梅 | 申请（专利权）人： | 江苏省中国科学院植物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;A01H5/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210014 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种农杆菌介导的诸葛菜转基因方法。当诸葛菜的主枝和部分侧枝现蕾并有几朵小花开放时，去除主花序和每个分枝花序已开放的花朵，只留下花蕾；将含有表达载体的农杆菌用渗透培养基悬浮，渗透培养基中含有表面活性剂Silwet L-77和蔗糖，Silwet L-77最佳浓度为500~1000μl/L，蔗糖最佳浓度为30~60g/L，喷洒于诸葛菜花序上，浸润后立即用羊皮纸包扎；同一花序连续喷洒3次，间隔2~3天；转化的7~10 天后，摘除花序上的羊皮纸袋和花序顶端的花及花蕾。该方法操作简单，所需成本降低，转基因效率高，实验周期短，在利用基因工程手段培育新型特种油料作物和诸葛菜突变体库建立方面都具有很好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 杆菌 诸葛 转基因 方法 | ||
【主权项】：
一种农杆菌介导的诸葛菜转基因方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将表达载体导入农杆菌中，其中表达载体带有抗除草剂基因Bar；（2）将步骤（1）中制备的农杆菌用渗透培养基悬浮；（3）将步骤（2）中含有悬浮农杆菌的渗透培养基喷洒于诸葛菜花序上；（4）将步骤（3）中转化后的植株采取单株收种，得到T0代种子，在培育过程中利用抗除草剂Basta筛选得到具有抗性的转基因植株。
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