[发明专利]一种荞麦耐盐突变体的诱变筛选方法在审

专利信息
申请号: 201410813692.1 申请日: 2014-12-24
公开(公告)号: CN104542266A 公开(公告)日: 2015-04-29
发明(设计)人: 杨洪兵;董春海;裴海霞 申请(专利权)人: 青岛农业大学
主分类号: A01H1/06 分类号: A01H1/06
代理公司: 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 代理人: 董芙蓉
地址: 266109 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 一种荞麦耐盐突变体的诱变筛选方法,采用EMS处理诱变荞麦种子,通过乙烯合成的直接前体ACC筛选对乙烯不敏感的荞麦突变体,然后将荞麦突变体栽培于盐度为0.4%~0.6%的盐碱地中,筛选耐盐植株,收取的荞麦种子,再次播种于盐度为0.4%~0.6%的盐碱地,进一步筛选性状稳定的荞麦耐盐突变体。本发明之荞麦耐盐突变体的诱变筛选方法,通过EMS诱变容易得到突变体,并且点突变对DNA损伤较小,同时结合利用ETH的直接前体ACC筛选相结合来筛选荞麦耐盐突变体,诱变频率高,目标明确,筛选效率高,可达10%~20%,操作成本低,获得的突变体性状稳定。
搜索关键词: 一种 荞麦 突变体 诱变 筛选 方法
【主权项】:
一种荞麦耐盐突变体的诱变筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)预处理荞麦种子:挑选籽粒饱满的荞麦种子,先用自来水洗净,接着用去离子水或蒸馏水振荡洗涤3~5h,吸水纸吸干;然后放入0.3%~0.4%甲基磺酸乙酯溶液中浸摇10~12h,捞出荞麦种子,最后用100mmol/L,pH 7.5的磷酸盐缓冲溶液冲洗2~3遍,去离子水或蒸馏水冲洗2~3遍,备用;(2)筛选荞麦突变体:将步骤(1)中备用的荞麦种子接种含有5μmol/L1‑氨基环丙烷‑1‑羧酸或20μmol/L1‑氨基环丙烷‑1‑羧酸的MS固体培养基上培养,筛选出对乙烯不敏感的荞麦突变体;(3)筛选荞麦耐盐突变体:将步骤(2)中筛选的对乙烯不敏感的荞麦突变体栽培于盐度为0.4%~0.6%的盐碱地中,筛选耐盐植株并收取种子;收取的荞麦种子再次播种于盐度0.4%~0.6%盐碱地,筛选性状稳定的耐盐突变体,收取种子。
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