[发明专利]用于检测食品中磺胺类药物残留的抗体芯片试剂盒及方法

摘要

本发明公开了一种检测食品中磺胺类药物残留的抗体芯片试剂盒，包括芯片、抗体、Cy3标记的二抗、提取试剂，所述抗体是由保藏号为CCTCC NO:C201148的杂交瘤细胞株4E5所分泌的单克隆抗体，所述芯片固定了磺胺类包被原。本发明还公开了一种用于检测食品中磺胺类药物残留的抗体芯片方法，该方法可以同时检测16种磺胺类药物，从而为食品中的磺胺类药物残留检测提供了一个快速、灵敏、高通量的方法。本发明所建立的检测方法准确度高，精密度好、检测效率高，与现有的方法相比，可以节省大量的时间和成本，具有更好的市场应用价值。

主权项

一种用于检测食品中磺胺类药物残留的抗体芯片方法，其特征在于包括以下步骤：1)样品前处理：样品匀浆后加入提取试剂提取；2)将样品液和稀释好的抗体按1∶1的体积比混合后加入到固定了磺胺类包被原溶液、以及对照溶液——卵清白蛋白溶液和Cy3标记的卵清白蛋白溶液的芯片上，于37℃反应0.5h，洗涤3次，甩干；3)将Cy3标记的二抗加到芯片，于37℃反应0.5h，洗涤3次，甩干；4)用InnoScan 700A扫描仪对芯片进行扫描，与卵清白蛋白溶液和Cy3标记的卵清白蛋白溶液进行对照，用Mapix分析软件进行结果分析，所述抗体是由保藏号为CCTCC NO:C201148的杂交瘤细胞株4E5所分泌的单克隆抗体；所述磺胺类包被原是2‑磺酰氨基‑4‑甲基嘧啶‑5‑羧酸与卵清蛋白偶联物；所述Cy3标记的二抗是Cy3标记的羊抗鼠或兔抗鼠抗体；所述抗体是用pH7.4的磷酸盐缓冲液稀释的，所述抗体的稀释度为1:800；所述磺胺类包被原溶液的浓度为10μg/mL，所述磺胺类包被原溶液的溶剂是含有5％甘油的pH9.16的碳酸盐缓冲液；所述芯片按如下方法制备：以晶芯高分子基片G作为基片，用围栏将基片分成12个反应区域，每个反应区域设三排三纵共9个微阵列，将磺胺类包被原溶液、以及两种对照溶液——卵清白蛋白溶液和Cy3标记的卵清白蛋白溶液分别点样在其中一排微阵列上，点样完成后固定0.5h，用2％牛血清白蛋白溶液封闭0.5h；所述提取试剂是按如下方法配制的：准确称取KH₂PO₄ 0.41g，K₂HPO₄ 5.59g，超纯水溶解，定容至1000mL。