[发明专利]一种热稳定性及比酶活提高的碱性α-淀粉酶突变体在审
| 申请号： | 201410852880.5 | 申请日： | 2014-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN104498453A | 公开（公告）日： | 2015-04-08 |
| 发明（设计）人： | 张桂敏;卢争辉;马延和 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | C12N9/28 | 分类号： | C12N9/28;C12N15/10;C12N15/70 |
| 代理公司： | 武汉河山金堂专利事务所42212 | 代理人： | 丁齐旭 |
| 地址： | 430016湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种热稳定性及比酶活提高的碱性α-淀粉酶突变体及其制备方法和应用。它是在GenBank登录号为KF451925.1的碱性α-淀粉酶基因Amy703基础上，缺失其N端669个核苷酸(223个氨基酸)，得到碱性α-淀粉酶突变体基因N-Amy703，将其转化大肠杆菌构建成基因工程菌，经诱导表达、纯化得到高热稳定性高比酶活的碱性α-淀粉酶突变体N-Amy703。突变体比酶活提高到170.15U/mg，是突变前的40倍；其在50℃的t1/2为28min，比突变前的t1/2提高了近4倍。同时其最适反应温度提高了10℃。本发明提供的N-Amy703酶学性质有大幅度改善，更适用于工业生产应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 热稳定性 提高 碱性 淀粉酶 突变体 | ||
【主权项】：
一种热稳定性及比酶活提高的碱性α‑淀粉酶突变体N‑Amy703，其特征在于在GenBank登录号为KF451925.1的碱性α‑淀粉酶基因Amy703，其对应的氨基酸序列收录号为AGT54942的基础上，设计引物FP、RP进行PCR，获得缺失N端669个核苷酸的α‑淀粉酶突变体基因N‑Amy703，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述引物为：FP:5’CGCGGATCCAATGTCTCTCACAACTTTAACCACAACC3’RP:5’CCGCTCGAGTTATTTCTGACCTCGCTTGTCACTC3’。
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