[发明专利]衍生自黑曲霉的新型葡萄糖氧化酶

摘要

本文公开的是新型葡萄糖氧化酶变体，除根据SEQ ID NO:1的两个置换T30V和I94V之外，另外还具有在多肽序列中的位置S53；A137；A173；A332；F414；和V560中任一个中的至少一个进一步的氨基酸置换。因此优化的葡萄糖氧化酶变体显示出对于葡萄糖的特异性和显著降低的耗氧率。在另一个方面，本发明提供了葡萄糖氧化酶变体，其具有显著降低的耗氧率和/或对于除氧外的电子介质增加的酶活性。本发明还提供了用于改善的血糖测量的具有本文公开的GOx变体中的至少一种的测定装置。

主权项

一种根据SEQ ID NO: 1的葡萄糖氧化酶，其选自：a）根据SEQ ID NO: 1的葡萄糖氧化酶，除两个氨基酸置换T30V和I94V之外，还具有在选自所述SEQ ID NO: 1中的S53；A137；A173；A332；F414；和V560的六个位置中的至少一个另外的氨基酸置换；或b）显示出与根据a）的葡萄糖氧化酶至少70%，特别是至少80%或> 90%的氨基酸序列同一性的葡萄糖氧化酶，条件是除所述两个氨基酸置换T30V和I94V之外，还具有在选自根据SEQ ID NO: 1的S53；A137；A173；A332；F414；和V560的六个位置中的至少一个另外的氨基酸置换，并且条件是根据b）的葡萄糖氧化酶显示出根据a）的葡萄糖氧化酶至少70%，特别是至少80%或> 90%的酶活性，并且显示出根据a）的葡萄糖氧化酶至少70%，特别是至少80%或> 90%的对于葡萄糖的酶特异性，并且条件是根据b）的葡萄糖氧化酶显示出根据SEQ ID NO: 1的所述葡萄糖氧化酶对于作为电子受体的氧降低至少5倍的活性，或显示出根据SEQ ID NO: 1的所述葡萄糖氧化酶对于除氧外的电子介质增加至少1.5倍的活性，或两者；或c）根据a）或b）的葡萄糖氧化酶的活性片段，条件是当与根据a）或b）的葡萄糖氧化酶相比较时，根据c）的活性片段具有如在a）或b）下概述的所述氨基酸置换，并且条件是根据c）的葡萄糖氧化酶显示出根据a）的葡萄糖氧化酶至少70%，特别是至少80%或> 90%的酶活性，并且显示出根据a）的葡萄糖氧化酶至少70%，特别是至少80%或> 90%的对于葡萄糖的酶特异性，并且条件是根据c）的葡萄糖氧化酶显示出根据SEQ ID NO: 1的所述葡萄糖氧化酶对于作为电子受体的氧降低至少5倍的活性，或显示出根据SEQ ID NO: 1的所述葡萄糖氧化酶对于除氧外的电子介质增加至少1.5倍的活性，或两者。