[发明专利]类胚体，基于细胞系的人工囊胚

摘要

本发明涉及用于制造至少双层的细胞聚集体和/或人工囊胚和/或被称为类胚体的进一步发育的类胚体的方法，所述方法包括从至少一个滋养细胞和至少一个多能和/或全能细胞形成双层的细胞聚集体，以及培养所述聚集体以获得人工囊胚。这种人工囊胚具有围绕囊胚腔的滋养外胚层样组织和内部细胞团样组织。所述细胞聚集体可以从全能或多能干细胞类型或诱导的多能干细胞类型与滋养干细胞的组合来形成。类胚体的形成可以通过将所述细胞聚集体在优选地包含Rho/ROCK抑制剂、Wnt途径调节物、PKA途径调节物、PKC途径调节物、MAPK途径调节物、STAT途径调节物、Akt途径调节物、Tgf途径调节物和Hippo途径调节物中的一种或多种的培养基中培养来实现。本发明还涉及用于使至少双层的细胞聚集体生长成人工囊胚和生长成进一步发育的类胚体、胎儿或活动物的方法。本发明还涉及包含所提到的化合物和/或细胞聚集体的体外细胞培养物。

主权项

一种制造至少双层的细胞聚集体或类胚体的体外方法，所述方法包括下列步骤：‑通过将至少一个滋养细胞与至少一个多能和/或全能细胞相组合来形成初始细胞聚集体；‑将所述初始细胞聚集体在培养基中培养，以获得包含内部细胞层和外部细胞层的至少双层的细胞聚集体，其中所述内部细胞层包含起源于所述至少一个多能和/或全能细胞并且能够形成胚胎的内部细胞，并且其中所述外部细胞层包含起源于所述至少一个滋养细胞并且能够至少形成滋养外胚层的外部细胞；以及‑优选地培养所述至少双层的细胞聚集体以获得类胚体。