[发明专利]用于流感诊断的方法和试剂盒

摘要

本文提供的一些实施方式涉及组合分析。在一些实施方式中，鉴别A型流感或B型流感的分析与测定流感神经氨酸酶对抗病毒药物的敏感性的分析组合。 1

主权项

1.测试物在制备用于检测流感病毒的试剂盒中的应用，所述测试物包括：

适于检测A型流感病毒或B型流感病毒的免疫分析的免疫分析缓冲剂；

检测A型或B型流感的免疫分析物；

交换基质，所述交换基质包括用于将免疫分析测试样品转化为神经氨酸酶分析测试样品的神经氨酸酶分析缓冲剂或用于将神经氨酸酶分析测试样品转化为免疫分析测试样品的免疫分析缓冲剂；和

神经氨酸酶分析物。

2.权利要求1所述的应用，其中所述免疫分析缓冲剂与用于神经氨酸酶活性的分析不相容。

3.权利要求1所述的应用，其中所述免疫分析缓冲剂抑制神经氨酸酶活性。

4.权利要求1所述的应用，其中容器包含所述基质。

5.权利要求4所述的应用，其中所述容器包括多个室。

6.权利要求4所述的应用，其中所述容器包括含所述交换基质的室，和包含用于所述神经氨酸酶分析的试剂的室。

7.权利要求1所述的应用，其中所述交换基质包括交联多糖。

8.权利要求1所述的应用，其中所述交换基质选自葡聚糖凝胶和琼脂糖。

9.权利要求4所述的应用，其中容器经调整使得免疫分析测试样品和神经氨酸酶测试样品可通过选自重力、毛细作用和扩散的一种或多种力在所述容器中移动。

10.权利要求4所述的应用，其中所述容器包括套筒。

11.权利要求4所述的应用，其中所述容器包括适于使用光电倍增器读取的多孔套筒。

12.权利要求11所述的应用，其中所述光电倍增器选自光电倍增管和微光电倍增管。

13.权利要求11所述的应用，其中所述光电倍增器为便携式的。

14.权利要求11所述的应用，其中所述光电倍增器处于适合于初级护理医师办公室的便携式读取器中。

15.权利要求11所述的应用，其中所述光电倍增管表面为圆形且具有6mm到9mm的直径，或所述微光电倍增管为矩形且具有1mm到3mm的尺寸。

16.权利要求1所述的应用，其中所述神经氨酸酶分析缓冲剂包括用于测定神经氨酸酶对测试化合物的敏感性的试剂。

17.权利要求16所述的应用，其中所述神经氨酸酶分析包括用于如下的试剂：

(a)获得抑制值比率，其中所述比率包括与不存在测试化合物情况下的所述神经氨酸酶活性水平相比的存在所述测试化合物情况下的所述神经氨酸酶活性水平；和

(b)比较所述抑制值与抑制阈值的比率，进而测定所述神经氨酸酶活性对所述测试化合物的敏感性。

18.权利要求17所述的应用，其中所述抑制阈值通过检测A型或B型病毒测定。

19.权利要求18所述的应用，其中如果检测A型病毒，那么使用第一抑制阈值，如果检测B型病毒，那么使用第二抑制阈值。

20.权利要求19所述的应用，其中所述第一阈值比所述第二阈值低。

21.权利要求17所述的应用，其中所述抑制阈值通过所述测试化合物测定。

22.权利要求17所述的应用，进一步包括选择用于治疗所述流感的所述测试化合物。

23.权利要求1所述的应用，其中所述神经氨酸酶分析物包括包含信号传导酶的双酶分析物。

24.权利要求23所述的应用，其中神经氨酸酶活性产生用于所述信号传导酶的底物。

25.权利要求23所述的应用，其中所述神经氨酸酶分析物包括包含N‑乙酰基神经氨酸和荧光素的缀合物或N‑乙酰基神经氨酸和荧光素的缀合物的衍生物的试剂。

26.权利要求23所述的应用，其中神经氨酸酶活性产生用于所述信号传导酶的抑制剂。

27.权利要求23所述的应用，其中所述神经氨酸酶分析物包括包含N‑乙酰基神经氨酸和三氟甲基酮的缀合物或N‑乙酰基神经氨酸和三氟甲基酮的缀合物的衍生物的试剂。

28.权利要求23所述的应用，其中所述信号传导酶包括荧光素酶。

29.权利要求28所述的应用，其中所述免疫分析缓冲剂抑制荧光素酶活性。

30.权利要求1所述的应用，其中所述神经氨酸酶活性水平使用光电倍增管测量。

31.权利要求17所述的应用，其中所述测试化合物为抗病毒药物。

32.权利要求17所述的应用，其中所述测试化合物为选自以下的抗病毒药物：奥司他韦(Oseltamivir)、扎那米韦(Zanamivir)、拉那米韦(Lanamivir)和帕拉米韦(Peramivir)。

33.权利要求1到32中任一项所述的应用，其中所述免疫分析包含夹心分析。

34.权利要求27所述的应用，其中所述N‑乙酰基神经氨酸和三氟甲基酮的缀合物或所述N‑乙酰基神经氨酸和三氟甲基酮的缀合物的衍生物包括用于双酶流感神经氨酸酶敏感性分析的经遮蔽抑制剂化合物，所述经遮蔽抑制剂化合物具有式(I)的结构：

其中R¹、R²和R³各自独立地为氢或C_1‑5烷基；

n为0、1、2或3；

R⁴为‑(CH₂)_mC(＝O)CF₃；

m为0或1；

X为‑S(O)_z‑或‑CH(R⁵)‑；

R⁵为‑S(O)_zCH₃；且

z为0、1或2。

35.权利要求34所述的应用，其中式(I)的化合物选自：

36.用于检测流感病毒的诊断系统，其包