[发明专利]寡糖的发酵生产

摘要

本申请公开了通过利用乳糖培养具有编码单个岩藻糖基转移酶的重组基因的遗传修饰的细胞，以高产量制备2′‑FL和DFL的混合物的方法。可以将得到的2′‑FL和DFL的混合物进行用酸起始的或由岩藻糖苷酶介导的水解，从而以高产量产生岩藻糖。

主权项

获得2′‑FL和DFL的混合物的方法，其包括以下步骤：在含有乳糖的水性培养基中，培养具有编码单个糖基转移酶的重组基因的遗传修饰的细胞，优选大肠杆菌(E.coli)细胞，更优选LacZ^‑Y⁺大肠杆菌细胞，所述糖基转移酶是岩藻糖基转移酶，优选1，2‑岩藻糖基转移酶，其能够修饰乳糖或在从乳糖生物合成2′‑FL或DFL的途径中的中间体，并且其对于从乳糖合成2′‑FL或DFL是必需的；所述方法特征在于：‑优选以连续的方式，向培养基中加入至少50，优选至少75，更优选至少100，甚至更优选至少125克的乳糖/1升的初始培养体积，以致培养基的最终体积不大于培养前的培养基的体积的三倍，优选不大于两倍，更优选小于两倍；或‑优选以连续的方式，向培养基中加入乳糖多于4天，优选多至7天；或‑优选以连续的方式，向培养基中加入至少50，优选至少75，更优选至少100，甚至更优选至少125克的乳糖/1升的初始培养体积，多于4天，优选多至7天，以致培养基的最终体积不大于培养前的培养基的体积的三倍，优选不大于两倍，更优选小于两倍。