[发明专利]用于改变基因产物表达的CRISPR-CAS系统和方法、结构信息以及诱导型模块化CAS酶

摘要

本发明提供了用于改变靶基因序列以及相关基因产物的表达的系统、方法和组合物。提供了关于CRISPR‑Cas系统的Cas蛋白的结构信息，这种信息在产生CRISPR复合物的修饰组分中的用途，编码CRISPR复合物的一种或多种组分或修饰组分的载体和载体系统，以及此类载体和组分的设计和使用方法。还提供了引导CRISPR复合物在真核细胞中形成的方法以及用于利用该CRISPR‑Cas系统的方法。具体而言，本发明包括优化的模块化CRISPR‑Cas酶系统的工程化。

主权项

一种非天然存在的或工程化的诱导型CRISPR‑Cas系统，包含：第一CRISPR酶融合构建体，其附接至诱导型二聚体的第一个一半，和第二CRISPR酶融合构建体，其附接至该诱导型二聚体的第二个一半，其中该第一CRISPR酶融合构建体可操作地连接至一个或多个核定位信号，其中该第二CRISPR酶融合构建体可操作地连接至一个或多个核输出信号，其中与诱导物能量源接触使该诱导型二聚体的该第一个一半和该第二个一半聚到一起，其中使该诱导型二聚体的该第一个一半和该第二个一半聚到一起允许该第一CRISPR酶融合构建体和该第二CRISPR酶融合构建体构成功能性CRISPR‑Cas系统，其中该CRISPR‑Cas系统包含指导RNA(sgRNA)，该指导RNA包含能够杂交到细胞中的感兴趣的基因组座位中的靶序列上的指导序列，并且其中该功能性CRISPR‑Cas系统结合至该靶序列，并且可选地，编辑该基因组座位以改变基因表达。