[发明专利]一种小麦丛矮病抗性的规模化定量强化接种鉴定方法

摘要

本发明公开了一种小麦丛矮病抗性的规模化定量强化接种鉴定方法，该方法步骤如下：（a）、获取大田灰飞虱并分离纯化出大量整齐一致的5龄灰飞虱若虫；（b）、繁育并分离筛选出大量整齐一致2龄灰飞虱若虫；（c）、对获取的2龄灰飞虱若虫饲毒；（d）、计量灰飞虱若虫；（e）、将待测小麦品种与带毒2龄灰飞虱若虫定量共育传毒；（f）、大田显症统计：将待测小麦移栽至大田隔虫网室，抽穗期调查统计丛矮病穴发病率，即可准确鉴定出待测小麦品种的抗病能力。本发明的规模化强化接种鉴定方法克服了排趋性的干扰和灰飞虱规模量获取的难题，实现了定量而强化的小麦丛矮病接种鉴定，能够准确地评价小麦品种对小麦丛矮病的抗性水平。

主权项

一种小麦丛矮病抗性的规模化定量强化接种鉴定方法，其特征在于：所述的定量强化接种鉴定方法步骤如下：（a）、采用搪瓷盘法从田间采集灰飞虱后通过纯化筛选装置获取大量5龄灰飞虱若虫；（b）、将筛选获得的5龄灰飞虱若虫接种到作物昆虫共育箱内培育的水稻上共育并繁育下一代灰飞虱若虫，并进一步利用调整的纯化筛选装置分离获取大量整齐一致的2龄灰飞虱若虫；（c）、将筛选获得的2龄灰飞虱若虫移入栽有小麦丛矮病重灾区取材的小麦丛矮病病株上进行饲毒；（d）、通过精密电子天平称重获得单头2龄灰飞虱若虫的重量，根据确定的虫/苗比例计算所需灰飞虱总重，进而称重定量；（e）、根据确定的虫/苗比例将饲毒后的定量2龄灰飞虱若虫接种到作物昆虫共育箱内栽培的待测小麦幼苗上共育传毒；（f）、待灰飞虱半数死亡时将待测小麦移栽至大田隔虫网室，常规栽培管理，抽穗期调查统计丛矮病穴发病率，并根据丛矮病穴发病率准确鉴定出待测小麦品种的抗病能力；所述步骤（a）中的灰飞虱收集时间为每年五月下旬～六月上旬小麦田由青转黄期；所述步骤（a）中的纯化筛选装置使用时，采用孔径为22目和26目的分样筛组合以有效分离出5龄灰飞虱若虫和部分灰飞虱成虫；然后将筛选分离出的灰飞虱倒入内壁光滑的深桶内，拍击桶外壁使得灰飞虱成虫飞离而若虫滞留，即可获得大量整齐一致的5龄灰飞虱若虫；所述步骤（b）中的5龄灰飞虱若虫接种到作物昆虫共育箱内培育的水稻上时，与5龄灰飞虱若虫共育的水稻为2～3叶期；所述步骤（b）中的作物昆虫共育箱的培养温度控制在25℃、光14h/暗10h；所述步骤（b）中的作物昆虫共育箱内繁育下一代灰飞虱若虫后，此时纯化筛选装置翻转90°将垂直的趋光方向改变为水平方向，采用孔径为32目和35目的分样筛组合以有效分离获得大量整齐一致的2龄灰飞虱若虫；所述步骤（c）中的小麦丛矮病病株为上一年自小麦丛矮病重灾区取材后于‑20℃的冰箱冷藏的，待病株自然解冻后将根用浸水脱脂棉包裹并用塑料布包扎结实模拟大田移栽方式垂直固定于作物昆虫共育箱内，然后移入2龄灰飞虱若虫饲毒不低于48h；所述步骤（d）中的2龄灰飞虱若虫饲毒后采用趋光分离毛刷刷离灰飞虱若虫时夹杂的杂质和死虫，然后转移20～50头灰飞虱若虫进称量瓶，通过精密电子天平称重，去皮计算瓶内灰飞虱若虫的总重后根据瓶内灰飞虱若虫的数量，计算得到单头灰飞虱若虫的重量，根据待测小麦株数和接种强度确定饲毒灰飞虱若虫数目，进而计算接种所需饲毒灰飞虱若虫的总重并称重定量；所述步骤（e）中的待测小麦是经过人工春化预处理后播种的，待其生长处于1～2叶期，且待测小麦按照20cm2/株的比例留取长势健康均匀的幼苗；所述步骤（e）中的待测小麦按照5～15虫/苗的比例接种饲毒后的2龄灰飞虱若虫，作物昆虫共育箱内20℃、光12h/暗12h共育传毒至接种的灰飞虱自然衰老死亡。