[发明专利]一种真姬菇液体菌种的快速制备方法及使用方法

摘要

一种真姬菇液体菌种的快速制备方法及使用方法，包括以下步骤（1）、配制培养基（2）、装瓶灭菌将配好的培养基装入培养瓶，封口后，放入高压灭菌锅中灭菌；（3）、固体菌种的液化处理用无菌水洗涤静置，取固体菌种所得的上清液；（4）接种灭菌完成后，等培养液温度冷却后，接入固体菌种上清液；（5）、培养将接种好的培养瓶放到摇床中避光密闭培养，培养4天后即可得到真姬菇的液体菌种。本发明不使用发酵罐，不需要通气或者搅拌培养，可以减少投资，降低生产成本，非常适合大批量的成产和推广；制备的真姬菇液体菌种，及时使用能保证菌丝的良好活性，样品中菌丝浓度适中，培养液清澈透亮，便于观察菌丝生长状况，能及时发现和处理污染的菌种，减少因为菌种污染接种造成的不必要损失。

主权项

一种真姬菇液体菌种的快速制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）、配制培养基：将洗净新鲜的马铃薯去皮，称取300g切成小块、小条或薄片，向其中加水1000 mL，煮沸20‑30 min，用事先浸湿拧干的4层纱布过滤去渣，收集液汁，并向其中加入葡萄糖30 g、蛋白胨5g，消泡剂0.3g，磷酸二氢钾l g以及硫酸镁0.5 g搅拌均匀，并补足水分定容至1000ml，最后用氢氧化钠水溶液调整pH至5.0‑6.0得到培养基；（2）、装瓶灭菌：按照每瓶装入的液体量为培养瓶体积的60%，将配好的培养基装入培养瓶，封口后，放入高压灭菌锅中灭菌；所述的培养瓶为三角瓶、广口的塑料瓶或玻璃瓶；（3）固体菌种的液化处理：在无菌超净工作台中将固体菌种捣碎放入无菌水中洗涤静置，得固体菌种的上清液；（4）、接种：灭菌完成后，等培养基温度冷却到22℃以下后，接入固体菌种上清液；（5）、培养：将接种好的培养瓶放到摇床中避光密闭培养，培养4天后即可得到真姬菇的液体菌种；所述摇床温度控制在20‑22℃，转速为150转/分钟，湿度保持在60‑70%；所述步骤（2）中封口采用的是中间带透气孔的硅胶塞；所述步骤（2）中的高压灭菌程序为121℃下保持30min；所述步骤（3）中的固体菌种的液化处理是指用2倍体积的无菌水洗涤1倍体积的固体菌种静置所得上清液；所述步骤（4）中的固体菌种上清液按培养基体积的10%接入培养瓶。