[发明专利]一种玉米粗缩病抗性的规模化接种鉴定方法

摘要

本发明公开了一种玉米粗缩病抗性的规模化接种鉴定方法，该接种鉴定方法步骤如下（a）、获取大田灰飞虱并分离纯化出大量整齐一致的5龄灰飞虱若虫；（b）、繁育并分离筛选出大量整齐一致的2龄灰飞虱若虫；（c）、对获取的2龄灰飞虱若虫饲毒；（d）、计量灰飞虱若虫；（e）、将待测玉米品种与带毒2龄灰飞虱若虫定量共育传毒；（f）、待测玉米品种大田显症统计将待测玉米移栽至大田隔虫网室，玉米扬花期调查粗缩病发病情况，即可准确鉴定出待测玉米品种的抗病能力。本发明的强化接种鉴定方法克服了排趋性的干扰和灰飞虱规模量的难题，实现了定量而强化的水稻黑条矮缩病接种鉴定，能够准确地评价水稻品种对水稻黑条矮缩病的抗性水平。

主权项

一种玉米粗缩病抗性的规模化接种鉴定方法，其特征在于：所述的接种鉴定方法步骤如下：（a）、采用盘托法从田间采集灰飞虱后通过纯化筛选装置获取5龄灰飞虱若虫；（b）、将筛选获得的5龄灰飞虱若虫接种到作物昆虫共育箱内培育的水稻上共育并繁育下一代灰飞虱若虫，并进一步利用调整的纯化筛选装置分离获取整齐一致的2龄灰飞虱若虫；（c）、将筛选获得的2龄灰飞虱若虫移入栽有水稻黑条矮缩病重灾区取材的分蘖盛期水稻病株上进行饲毒，2龄灰飞虱若虫饲毒后计重获得单头2龄灰飞虱若虫的重量；（d）、通过精密电子天平称重获得单头2龄灰飞虱若虫的重量，根据确定的虫/株比例计算所需灰飞虱总重，进而称重定量；（e）、根据确定的虫/株比例将饲毒后的定量2龄灰飞虱若虫接种到作物昆虫共育箱内栽培的待测玉米品种幼苗上共育传毒；（f）、待灰飞虱半数死亡后将待测玉米移栽至大田隔虫网室，常规栽培管理，玉米扬花期按0至4级分级标准调查粗缩病发病情况，并根据粗缩病发病情况能够准确鉴定出待测玉米品种的抗病能力；所述步骤（a）中的灰飞虱收集时间为每年五月下旬‑六月上旬期小麦田由青转黄期；所述步骤（a）中的纯化筛选装置使用时，采用孔径为24目和28目的分样筛组合以有效分离出5龄灰飞虱若虫和部分灰飞虱成虫；然后将筛选分离出的灰飞虱倒入内壁光滑的深桶内，拍击桶外壁使得灰飞虱成虫飞离而若虫滞留，即可获得整齐一致的5龄灰飞虱若虫；所述步骤（b）中的5龄灰飞虱若虫接种到作物昆虫共育箱内培育的水稻上时，与5龄灰飞虱若虫共育的水稻为2‑3叶期；所述步骤（b）中的作物昆虫共育箱的培养温度控制在25℃、光14h/暗10h；所述步骤（b）中的作物昆虫共育箱内繁育下一代灰飞虱若虫后，此时筛选装置翻转90°将垂直的趋光方向改变为水平方向，采用孔径为32目和35目的分样筛组合以有效分离获得整齐一致的2龄灰飞虱若虫；所述步骤（c）中的分蘖盛期水稻病株为上一年自水稻黑条矮缩病重灾区取材后于‑20℃的冰箱冷藏的，待病株自然解冻后将根用浸水脱脂棉包裹并用塑料布包扎结实模拟大田移栽方式垂直固定于作物昆虫共育箱内，然后移入2龄灰飞虱若虫饲毒48h；所述步骤（d）中的2龄灰飞虱若虫饲毒后趋光分离毛刷刷离灰飞虱若虫时夹杂的杂质和死虫，然后转移部分灰飞虱若虫进称量瓶，通过精密电子天平称重，去皮计算瓶内灰飞虱若虫的总重后根据瓶内灰飞虱若虫的数量，计算得到单头灰飞虱若虫的重量，以根据待测玉米株数和接种强度确定饲毒灰飞虱若虫数目，进而计算接种所需饲毒灰飞虱若虫重量并称重定量；所述步骤（e）中的待测玉米生长处于2‑3叶期，且待测水稻按照30cm2/株的比例留取长势健康均匀的玉米苗；所述步骤（e）中的待测玉米按照25虫/株的比例接种饲毒后的2龄灰飞虱若虫，作物昆虫共育箱的培养温度控制在20℃、光14h/暗10h共育传毒至接种的灰飞虱自然衰老死亡；所述步骤（f）中的抗病能力为免疫、高抗、抗病、感病和高感，病指分别为0、0‑10、10‑30、30‑50、〉50；所述步骤（e）中的饲毒后为饲毒2天后。