[发明专利]一种快速定量检测脑钠肽的均相荧光免疫试剂组及其制备方法

摘要

本发明提供了一种快速定量检测脑钠肽的均相荧光免疫试剂组及其制备方法。本发明所述的快速定量检测脑钠肽的均相荧光免疫试剂组，包括稀土元素螯合物标记的抗脑钠肽单克隆抗体(anti‑BNP)、近红外荧光化合物标记的抗脑钠肽单克隆抗体和系列浓度的脑钠肽校准品。本发明可定量检测人体内BNP水平，且成本低廉，操作简单、快速、灵敏，且特异性好，只需要配套专用均相荧光免疫检测仪，因此可广泛应用于各级医疗检验场所，尤其是基层医疗机构，包括乡镇卫生院等均可开展，对于心脑血管事件发生的预防有极为重要的意义。

主权项

一种快速定量检测脑钠肽的均相荧光免疫试剂组，其特征在于，包括稀土元素螯合物标记的抗脑钠肽单克隆抗体、荧光化合物标记的抗脑钠肽单克隆抗体和系列浓度的脑钠肽校准品，稀土元素螯合物为BHHCT‑Eu3+或BHHBCB‑Eu3+，荧光化合物为Alexa647、DyLight‑DY647和CF647中的至少一种；且所述试剂组的制备方法包括以下步骤：1)稀土元素螯合物标记的抗脑钠肽单克隆抗体的制备：取0.5‑5mg/ml的抗脑钠肽单克隆抗体溶液，加入0.05‑0.5mol/L的NaHCO3溶液后，调pH至8.5‑10，滴加10‑100μg/ml配体化合物溶液，搅拌反应0.6‑2h，分离得到配体化合物标记的抗脑钠肽单克隆抗体，加入终浓度为0.05‑0.5wt％的BSA和0.01‑1wt％的NaN3，调pH至5.5‑6.5，免疫分析前，加入Eu3+溶液，使配体化合物与Eu3+等摩尔浓度，即得，其中，抗脑钠肽单克隆抗体溶液、NaHCO3溶液和配体化合物溶液的体积比为0.1‑1∶1∶0.01‑0.05；2)荧光化合物标记的抗脑钠肽单克隆抗体的制备：将抗脑钠肽单克隆抗体用0.05‑0.5mol/L的NaHCO3溶液稀释至0.5‑5mg/ml，加入荧光化合物溶解液，搅匀，室温孵育0.5‑2h，分离得到荧光化合物标记的抗脑钠肽单克隆抗体；3)系列浓度的脑钠肽校准品的制备：将脑钠肽用校准品稀释液稀释配制成系列浓度，即得，其中，1)、2)和3)的顺序可以任意颠倒。