[发明专利]一种用于雄激素受体转录后修饰位点预测的体外迷你报告基因及应用

摘要

本发明涉及一种用于雄激素受体转录后修饰位点预测的体外迷你报告基因及应用。实验表明，lncRNAPCGEM1通过调控雄激素受体异构体AR‑V7(AR3)pre‑mRNA的转录后修饰，直接决定了表达雄激素受体的肿瘤的激素去势治疗后去势抵抗或复发转移；在此基础上，选取AR的pre‑mRNA的包含外显子Exon3和Exon4之间序列，通过基因克隆构建迷你报告基因；一方面，该迷你报告基因用于预测前列腺癌等雄激素受体相关肿瘤的激素去势复发及转移的高度危险因子；另一方面，通过该迷你报告基因，可以能够直观和高效、准确的验证和阻断该特异性目标基因位点的表达及作用。

主权项

一种用于雄激素受体转录后修饰位点预测的AR3迷你报告基因质粒，其特征在于，所述AR3迷你报告基因质粒通过下述方法克隆构建：a)通过PCR法，以SEQ ID NO.1及SEQ ID NO.3所示的序列作为引物，以人类基因组DNA为模板扩增AR的外显子exon3和部分内含子序列；b)通过PCR法，以SEQ ID NO.2及SEQ ID NO.5所示的序列作为引物，以人类基因组DNA为模板扩增AR的内含子加上部分外显子exon3b序列；c)以SEQ ID NO.4及SEQ ID NO.6所示的序列作为引物，应用PCR法扩增mCherry；d)将a)、b)和c)扩增产物通过常规方法顺序连接克隆进pCDH‑Pu载体，插入位点为EcoR I和Not I酶切位点。