[发明专利]一种麻虾抗氧化肽及其分离提取方法与应用

摘要

本发明属于食品生物技术领域，具体涉及一种麻虾抗氧化肽及其分离提取方法与应用。所述麻虾抗氧化肽具有Gly‑Phe‑Trp的氨基酸序列，其分离提取方法为将麻虾用蛋白酶酶解得到麻虾蛋白酶解产物；然后用弱极性树脂对其进行分离，得到肽粉B；将肽粉B用葡聚糖凝胶色谱柱分离，得到肽粉B3；将肽粉B3用反相高效液相色谱柱进一步纯化，即得麻虾抗氧化肽。本发明的麻虾抗氧化肽具有很强的抗氧化性能，可应用于食品、化妆品、医药等领域。

主权项

一种麻虾抗氧化肽的分离提取方法，其特征在于：所述麻虾抗氧化肽具有Gly‑Phe‑Trp的氨基酸序列，其分离提取方法包括以下操作步骤：(1)将麻虾打成浆状，然后与水按质量比为1：(0.5～5)混合，加入蛋白酶酶解1～6h，灭酶，冷却，上清液浓缩干燥，得到麻虾酶解液粉末；(2)将麻虾酶解液粉末采用弱极性树脂进行分离，依次用蒸馏水、体积分数为10％～29％、30％～49％、50％～69％及70％～89％的乙醇溶液梯度洗脱，收集10％～29％的乙醇溶液洗脱组分进行冷冻干燥处理，得到肽粉B；(3)将肽粉B用葡聚糖凝胶色谱柱分离，以蒸馏水为流动相进行洗脱，按洗脱的时间先后依次得到三个组分，收集第三个组分冷冻干燥，得到肽粉B3；(4)将肽粉B3采用反相高效液相色谱进行进一步分离纯化，以A相‑B相为流动相进行洗脱，其中A相为乙腈，B相为体积分数为0.1％～0.2％的三氟乙酸水溶液，按洗脱的时间先后依次得到两个组分，收集第二个组分冷冻干燥处理，得到氨基酸序列为Gly‑Phe‑Trp的麻虾抗氧化肽；步骤(1)中所述的蛋白酶为木瓜蛋白酶和胰酶中的一种或两种；步骤(2)中所述的弱极性树脂是指XAD‑16树脂；步骤(3)中所述的葡聚糖凝胶色谱柱是指Sephadex G‑15葡聚糖凝胶色谱柱；步骤(4)中所述的分离纯化条件为：色谱柱为XBridgeTM pre C18柱，洗脱程序为：0‑7min内采用A相体积分数为5％；7‑12min内A相体积分数逐渐增加至38％；12‑20min内A相体积分数逐渐增加至55％，20‑25min内A相体积分数逐渐增加至90％，25‑30min A相的体积分数为90％。