[发明专利]一种荧光光谱法测胆固醇含量鉴别地沟油的方法

摘要

本发明公开了一种荧光光谱法测胆固醇含量鉴别地沟油的方法，沟油中一般会混入动物油，动物油中含有油脂，会存在比普通植物油多的胆固醇，所以从胆固醇方面入手，也是检测地沟油的有效手段。胆固醇本身具有荧光，其中最大荧光激发波长λex＝266nm，最大荧光发射波长λem＝280nm，配置一系列浓度的标准胆固醇溶液，可以做出荧光强度随浓度变化的标准曲线，进行胆固醇定量测定。将地沟油加入KOH和乙醇进行皂化，然后加入正己烷萃取，通入N2气吹干后，采用荧光光谱法对样品进行定性和定量分析。

主权项

一种荧光光谱法测胆固醇含量鉴别地沟油的方法，其特征在于包括以下步骤：步骤A、标准溶液的配置：(1)称取CTAB加水溶解，摇匀配成摩尔浓度为3.0～4.0mmol/L的CTAB溶液；(2)胆固醇标准储备溶液：取胆固醇加无水乙醇溶解，摇匀配成质量浓度为0.8～1.2g/L的胆固醇溶液；(3)移取上述已配置好的胆固醇溶液2.5mL，置于100mL的容量瓶中，待乙醇蒸干后，用配好的CTAB溶液定容至刻度，配成0.025g/L的胆固醇溶液；胆固醇标准系列溶液：用移液管分别移取上述配好的0.025g/L的胆固醇溶液0.2、0.4、1.2、2.0、2.8、3.6、4.4、5.2、6.0、8.0mL到10mL的试管中，用上述CTAB溶液定容，胆固醇溶液的浓度分别为0.0005、0.001、0.003、0.005、0.007、0.009、0.011、0.013、0.015、0.02g/L；步骤B、样品处理：分别取植物油、猪油、地沟油、以及由食用油与地沟油混合后的油2.0～4.0g于50mL容量瓶中，依次加入3～5mL 0.5mol/L的KOH溶液和8～12mL无水乙醇，轻轻摇匀后，置于50℃～60℃恒温水浴锅进行4h～6h皂化，期间每隔20～30min振摇容量瓶，使油样造化完全，皂化完成后，取出容量瓶冷却至室温，依次加入8～10mL正己烷，轻轻振荡容量瓶，后静置分层1～2h，将上层液倒出，重复上述萃取过程两次，后将三次萃取液合并，用移液管吸取萃取液5～8mL置于小玻璃瓶中，用氮气将瓶中正己烷吹干，加入10ml CTAB溶液进行荧光检测；步骤C、荧光光谱仪条件的构建：荧光光谱仪：F2500型，日本日立；狭缝宽度：EX＝5nm，EM＝5nm，λex＝266nm，λem＝280nm ；扫描速度：光电倍增管电压400V ；步骤D、样品测定和结果判断：在上述荧光光谱条件下，测定胆固醇标准系列溶液得标准曲线，利用标准曲线计算待测溶液中胆固醇的含量；如待测样品在激发波长为266nm处，能检出280nm处的发射峰，则表明待测样品中存在胆固醇，与合格植物油相比，如果超过了合格植物油的峰值，则认为此油为地沟油或者是植物油中混有地沟油。