[发明专利]一种野生竹节参无糖开放式组织培养快速育苗方法

摘要

本发明公开了一种野生竹节参无糖开放式组织培养快速育苗方法，A、取野生竹节参幼苗的茎或叶，经表面灭菌处理B、将步骤A处理的外植体接种至竹节参无糖组织培养初代培养基中，置于上开口的透明玻璃植物生长箱进行初代培养；C、将步骤B培养的无根苗进行筛选并用无菌水冲洗，将冲洗干净的无根苗切割为单苗；D、将经步骤C处理的单苗接种至竹节参无糖组织培养继代培养基中，置于透明玻璃植物生长箱进行继代培养。E、将D中得到的植株移栽于腐殖土和蛭石混合的土壤中，按常规方式培植。利用本发明所述方法，外植体的分化率在90%以上，增值率可达4.2，污染率极少，获得的都是可以用于种植的合格健壮组培苗，移栽成活率在98%以上。

主权项

一种野生竹节参无糖开放式组织培养育苗方法，其步骤如下：A.外植体的选取与消毒处理：取野生竹节参幼苗的茎或叶，经表面灭菌处理后，在无菌条件下将茎切段、叶切片作为组培用的外植体；B.初代无糖组织培养：将经步骤A处理的外植体接种至竹节参无糖组织培养初代培养基中，置于上开口的透明玻璃植物生长箱进行初代培养；C.无根苗筛选：将经过步骤B培养的无根苗进行筛选，选择大小为1‑2.5cm的无根苗并用无菌水冲洗，将冲洗干净的无根苗切割为1‑2.5cm单苗；D.继代无糖组织培养：将经步骤C处理的单苗接种至竹节参无糖组织培养继代培养基中，置于透明玻璃植物生长箱进行继代培养。E.植株的移栽：将D中得到的3～5cm高的植株移栽于腐殖土和蛭石按体积比为5:1混合的土壤中，按常规方式培植；所述的竹节参无糖组织培养初代培养基的配方为：不含糖和琼脂的MS+GA₃0.8～1.2mg/L+6‑BA 2.0～3.5mg/L+椰子汁100—150g/L+活性炭200—300mg/L+0.25毫米的蛭石8—10g/L，PH为5.8。步骤B的培养周期25—45天，CO₂浓度650±50μL/L，培养温度22℃—27℃，利用LED灯进行光照，光质红光：蓝光为1:1—3:1，光照强度1500—2500Lx，光照时间10—16小时/天；所述的竹节参无糖组织培养继代培养基的配方为：不含糖和琼脂的MS+6‑BA0.8～1.2mg/L+IBA 2.7～3.3mg/L+椰子汁100—150g/L+活性炭300—600mg/L+0.25毫米的蛭石8—10g/L，pH为5.8；步骤D的培养周期30—50天，CO₂浓度650±50μL/L，培养温度22℃—27℃，利用LED灯进行光照，光质红光：蓝光为1:1—3:1，光照强度1500—2500Lx，光照时间10—16小时/天；所述的上开口透明玻璃植物生长箱在培养箱中离液体培养基液面以上0.5cm处设置有进气口，在培养箱中离液体培养基液面以上2cm处设置有二氧化碳监测仪，二氧化碳与空气的混合气体通过进气口进入植物生长箱中，通过调整二氧化碳与空气的比例，使得二氧化碳检测仪检测的二氧化碳浓度在650±50μL/L。