[发明专利]一种交联抗体及其在免疫检测中应用

摘要

本发明提供一种交联抗体，所述抗体包括由非人的TORCH病原体抗体和健康的未感染TORCH病原体的人抗体所形成的四聚体，本发明还提供了交联抗体作为替代病人阳性血液的质控品在免疫检测试剂盒中的应用。所述异源交联物生产制备简单、成本低，同时具有非常好的安全性和稳定性，可有效降低检测误差。

主权项

1.一种作为病人阳性血液病原体抗体替代物的交联抗体，其特征在于，所述的交联抗体由小鼠anti‑HSV‑I McAb和健康的未感染HSV‑I的人IgG通过交联反应所形成的四聚体形式的异源交联抗体组成，所述交联反应形成的连接物结构式L选自4(a)，4(a)：，所述交联抗体的获得方法如下所示：(1)将5mg小鼠anti‑HSV‑I McAb溶解于交联缓冲液中，搅拌加入50μl SPDP交联剂，室温下反应2个小时后，装入透析袋，用还原缓冲液透析，换液四次，其中所述交联缓冲液为0.1M磷酸钾,0.1M NaCl,pH7.5，所述还原缓冲液为0.1M乙酸钠,0.1M NaCl,pH4.5，所述SPDP交联剂溶解于无水乙醇中，浓度为3.2mg/ml；(2)将5mg健康的未感染HSV‑I的人IgG溶解于交联缓冲液中，搅拌加入50μl SPDP交联剂，室温下反应2个小时后，装入透析袋，用交联缓冲液透析，换液四次；(3)在(1)中加入30μlDTT，室温反应30分钟后，装入透析袋，用交联缓冲液透析，换液四次，其中所述DTT溶解于0.01M乙酸钠溶液中，浓度为1M，pH5.2；(4)将(2)、(3)中的处理物混合，在4℃下反应15个小时；(5)往(4)中加入0.4mg碘乙酰胺封闭剂，反应30分钟以封闭未反应的活性基团，然后装入透析袋，用交联缓冲液透析，换液四次；(6)将(5)中的产物装载到HiLoad 16/60 Superdex 200 PG凝胶过滤柱中，以交联缓冲液进行洗脱，并利用HD‑3紫光分析仪实时检测洗脱产物在280nm波长时的吸光值，同时用XWT‑S小型记录仪绘制层析图谱，按峰收集洗脱产物；(7)获得含有四聚体形式的异源交联抗体的异源交联物。