[发明专利]ddPCR技术监测肺癌患者对酪氨酸激酶抑制剂继发耐药的方法

摘要

本发明提供了一ddPCR技术监测肺癌患者对酪氨酸激酶抑制剂继发耐药的方法，及其在监控酪氨酸激酶抑制剂治疗肺癌过程中的应用。本发明首先对肺癌患者外周血浆进行DNA抽提，再利用ddPCR技术检测其中EGFR的耐药突变位点T790M的突变情况，并以此判定该患者是否产生耐药。

主权项

一种对EGFR基因耐药突变位点进行检测的方法，其特征在于，包括步骤：(1)提供一检测样本，所述的检测样本是血浆样本、血清样本或血液样品；(2)对所述的检测样本进行DNA抽提处理，从而获得含抽提DNA的DNA抽提物，其中对于每2毫升的检测样本而言，所述DNA抽提物是体积为20‑100微升且DNA浓度大于30ng/微升的提取液；(3)以步骤(2)所得到的DNA提取物为模板，进行微滴式数字PCR(ddPCR)，从而获得含所述的耐药突变位点的扩增产物；和(4)对所述扩增产物进行分析，从而得出EGFR基因耐药突变位点的突变形式和/或比例。