[发明专利]ddPCR技术监控结直肠癌患者对帕尼单抗/西妥昔单抗耐药的方法在审
| 申请号： | 201510017010.0 | 申请日： | 2015-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN105838778A | 公开（公告）日： | 2016-08-10 |
| 发明（设计）人： | 丁飞飞;许骋;沈波;易静;张桢珍;吴云鸣;楼敬伟;张有成;王青兵;刘涛;刘冰 | 申请（专利权）人： | 上海宝藤生物医药科技股份有限公司;上海张江转化医学研发中心有限公司;上海宝藤医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 崔佳佳;陆凤 |
| 地址： | 201203 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种ddPCR技术监控结直肠癌患者对帕尼单抗/西妥昔单抗耐药的方法，及其在监控帕尼单抗/西妥昔单抗治疗结直肠癌过程中的应用。本发明首先对结直肠癌患者外周血浆进行DNA抽提，再利用ddPCR技术检测其中KRAS的耐药突变位点G13D的突变情况，并以此判定该患者是否产生耐药。 | ||
| 搜索关键词： | ddpcr 技术 监控 直肠癌 患者 帕尼单抗 西妥昔单抗 耐药 方法 | ||
【主权项】：
一种对KRAS基因耐药突变位点进行检测的方法，其特征在于，包括步骤：(1)提供一检测样本，所述的检测样本是血浆样本或血液样品；(2)对所述的检测样本进行DNA抽提处理，从而获得含抽提DNA的DNA抽提物，其中对于每2毫升的检测样本而言，所述DNA抽提物是体积为20‑100微升且DNA浓度大于30ng/微升的提取液；(3)以步骤(2)所得到的DNA提取物为模板，进行微滴式数字PCR(ddPCR)，从而获得含所述的耐药突变位点的扩增产物；和(4)对所述扩增产物进行分析，从而得出KRAS基因耐药突变位点的突变形式和/或比例。
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