[发明专利]一种从福寿螺肌肉组织中提取总RNA的方法

摘要

本发明涉及一种从福寿螺肌肉组织中提取总RNA的方法。包括以下步骤：（1）取新鲜福寿螺肌肉组织用DEPC水冲洗，放入液氮，在液氮条件下研磨成细粉状，然后转移到含有细胞裂解液的离心管中；（2）冰浴条件下，向步骤（1）中的离心管中加酸性水饱和酚，摇匀，加醋酸钠，以及氯仿和异戊醇混合液，冰浴；（3）离心，分离沉淀相和液相；（4）转移液相到新的离心管中，加氯仿、异戊醇混合液；（5）离心，取上清，加等体积异丙醇沉淀；（6）离心，弃上清液，加1-1.5mL乙醇洗涤沉淀；（7）重复步骤（6）1-2次，空气干燥，加50-100μL无RNA酶水溶解沉淀，得到福寿螺肌肉组织总RNA溶液。本发明收率高，并且纯度高、质量完整性好，可以满足分子生物学研究应用。

主权项

一种从福寿螺肌肉组织中提取总RNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取新鲜福寿螺肌肉组织用DEPC水冲洗3‑5次，放入液氮，在液氮条件下研磨成细粉状，然后转移到含有0.3—0.5mL细胞裂解液的离心管中；（2）冰浴条件下，向步骤（1）中的离心管中加入酸性水饱和酚，摇匀，加0.1‑0.2mL醋酸钠，0.1‑0.2mL氯仿和异戊醇混合液，冰浴15min；（3）4℃离心，分离沉淀相和液相；（4）转移液相到新的离心管中，加等体积氯仿、异戊醇混合液；（5）离心，取上清，加等体积异丙醇‑20℃沉淀；（6）离心，弃上清液，加1‑1.5mL75%乙醇洗涤沉淀；（7）重复步骤（6）1‑2次，空气干燥，加50‑100μL无RNA酶水溶解沉淀，得到福寿螺肌肉组织总RNA溶液。