[发明专利]紫花苜蓿细胞质雄性不育系cms4-10种质及其选育和繁殖方法

摘要

本发明涉及一种紫花苜蓿细胞质雄性不育系cms4-10种质，该种质是采用下述方法获得：⑴以穴播种植3年的紫花苜蓿栽培品种甘农3号、天水、牧歌Graze401+Z、金皇后、公农1号、庆阳、河西、甘农1号、西部巨人、陇中、金达莱、甘农2号、巨人、阿尔冈金、苜蓿王、定西、陇东和中兰1号作为自然雄性不育突变体筛选种质资源库；⑵每个紫花苜蓿品种于花期进行花粉量分级测定；⑶配制Alexander染色液；⑷对单株花粉可育率进行测定；⑸判断是否为雄性可育、雄性不育；⑹对所述步骤⑴中自然雄性不育突变体筛选种质资源库进行筛选，获得紫花苜蓿品种牧歌Graze401+Z的雄性不育株cms4-10。本发明还公开了该种质的选育和繁殖方法。本发明性状稳定，且育种目标明确、程序简单。

主权项

紫花苜蓿细胞质雄性不育系cms4‑10种质，其特征在于：该种质是采用下述方法获得：⑴以穴播种植3年的紫花苜蓿栽培品种甘农3号、天水、牧歌Graze401+Z、金皇后、公农1号、庆阳、河西、甘农1号、西部巨人、陇中、金达莱、甘农2号、巨人、阿尔冈金、苜蓿王、定西、陇东和中兰1号作为自然雄性不育突变体筛选种质资源库；⑵每个紫花苜蓿品种于花期随机选择10株，每株不同分枝级别上随机选取5朵小花，弹小花花粉于干净整洁的黑色塑料板上，按常规方法采用花粉量分级测定法根据无花粉、少量花粉、适量花粉、大量花粉的四级分类，目测花粉量级别并记录；⑶配制Alexander染色液：ⅰ配制1%的孔雀石绿：将1g的孔雀石用100 ml的质量浓度为95%的酒精溶解，并搅拌10 min，然后静置3 h即得；ⅱ配制1%酸性品红：将1 g的酸性品红用100 ml蒸馏水溶解，即得；ⅲ配制1%橙红G：将1 g的橙红用蒸馏水溶解，即得；ⅴ依次将10 ml 质量浓度为95%的乙醇，1 ml 1%的孔雀石绿，50 ml蒸馏水，25 ml甘油，5 g苯酚，5 ml 1%的酸性品红，0.5 ml 1%的橙红G混合均匀后，即得Alexander染色液；⑷对单株花粉可育率进行测定：吸取150 μl Alexander染色液置于干净的载玻片上，再从每个单株上随机选取3个花序，每个花序取2朵小花，分别弹出花粉至Alexander染液中，染色30 min，在显微镜下观察花粉染色情况，若花粉能被染液染成红色，则表示花粉可育；若花粉被染成青蓝色，则表示花粉不育；选取5个视野，统计视野内可育花粉和不育花粉的总个数，并按下式计算花粉可育率：FPR=（可育花粉总数/观察花粉总数）×100%；⑸根据花粉量分级和花粉染色率结果，如果单株花粉量为大量或适量，且FPR≥10%，表示为雄性可育；单株花粉量为少量、无花粉，或FPR<10%，则表示为雄性不育；⑹对所述步骤⑴中自然雄性不育突变体筛选种质资源库进行筛选，获得紫花苜蓿品种牧歌Graze401+Z的雄性不育株4‑10。