[发明专利]一种晶状体上皮干细胞的分离培养方法有效
| 申请号： | 201510032551.0 | 申请日： | 2015-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN104789521B | 公开（公告）日： | 2017-11-07 |
| 发明（设计）人： | 侯睿;蔡惠民;李欧俏 | 申请（专利权）人： | 广州康睿生物医药科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/074 | 分类号： | C12N5/074 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)51222 | 代理人： | 李高峡,张娟 |
| 地址： | 510663 广东省广州市高新技术产业开*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种晶状体上皮干细胞的分离培养方法，它包括以下步骤(1)取晶状体前囊膜，剪成碎片，消化，将获得的细胞铺于包被有基质的培养瓶、培养板或培养皿中；(2)加入添加有含有15～25％FBS、50～150μg/L人表皮生长因子(FGF)、5‑10mg/L胰岛素、5‑10mg/L氢化可的松、5‑10mg/L霍乱弧菌毒素、0.01‑0.05mg/L3,3′,5‑碘‑L‑对羟基苯丙氨酸、1‑5mg/L腺嘌呤、5～10mg/L甘氨酸、6～12mg/L丙氨酸、10～16mg/L天冬酰胺、10～16mg/L天冬氨酸、12～18mg/L谷氨酸、8～15mg/L脯氨酸、7～14mg/L丝氨酸的MEM培养液，放入37℃孵箱中培养，2‑3天形成克隆，10‑14天可形成单层活性的晶体干细胞细胞。本发明还公开了一种晶状体上皮干细胞的分离培养液。本发明方法可以分离得到原代晶状体上皮干细胞，干细胞的活性高，本发明方法简便、易操作，应用前景良好。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 晶状体 上皮 干细胞 分离 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种晶状体上皮干细胞的分离培养方法，其特征在于：它包括以下步骤：(1)取晶状体前囊膜及附着的上皮，剪成碎片，消化，将获得的细胞铺于包被有基质的培养瓶、培养板或培养皿中；(2)加入添加有15～25％FBS、50～150μg/L FGF、5‑10mg/L胰岛素、5‑10mg/L氢化可的松、5‑10mg/L霍乱弧菌毒素、0.01‑0.05mg/L3,3′,5‑碘‑L‑对羟基苯丙氨酸、1‑5mg/L腺嘌呤、5～10mg/L甘氨酸、6～12mg/L丙氨酸、10～16mg/L天冬酰胺、10～16mg/L天冬氨酸、12～18mg/L谷氨酸、8～15mg/L脯氨酸、7～14mg/L丝氨酸、50～100U/mL青霉素、50～100μg/mL链霉素的MEM培养液，放入37℃孵箱中培养，得有活性的细胞，即得晶状体上皮干细胞。
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