[发明专利]促虫草菌高效代谢合成抗肿瘤化合物jiangxienone的方法

摘要

本发明公开了一种促虫草菌高效代谢合成抗肿瘤化合物jiangxienone的方法。本发明将通过添加亚铁离子来调控虫草菌高效发酵代谢合成抗肿瘤化合物jiangxienone，它能够有效提高江西虫草菌发酵代谢合成jiangxienone的效率，产量由1.0μg/g干菌丝体提高到221.26±6.79 g/g干菌丝体，极大提高了其产量。且该方法简单，易于操作，极其适合虫草菌液体深层发酵生产jiangxienone，对规模化生产jiangxienone及其成药性研究，都具有重要的理论意义和应用价值。

主权项

一种促虫草菌高效代谢合成抗肿瘤化合物jiangxienone的方法，其特征在于：包括如下步骤：1）江西虫草菌接种于斜面，在24‑28℃下培养7‑15天，在4 ℃下保存备用；斜面种子培养基的组成按质量百分比计算，包括葡萄糖 1‑4%、麦麸0.1‑1%、蛋白胨0.1‑1%、酵母粉0.1‑1%、磷酸二氢钾0.05‑0.15%、七水硫酸镁 0.01‑0.05%及琼脂1.8%，总量满足100%，初始pH为7；2）用接种针挑取0.5‑1 cm²斜面菌种块接种于摇瓶中，在温度为24‑28℃，转速为120‑200 rpm的条件下，摇床培养4‑7天；摇床中的液体种子培养基的装液量体积百分比为30‑60%，液体种子培养基的组成按质量百分比计算：包括葡萄糖1‑4%、蛋白胨0.1‑1%、酵母粉0.1‑1%、七水硫酸镁0.01‑0.05%及磷酸二氢钾0.05‑0.15%，磷酸氢二钾0.05‑0.15%，总量满足100%，初始pH为7；3）另取一个新的摇瓶，在新的摇瓶中加入发酵培养基，装液量体积百分比为40‑70%，再将步骤2）中培养获得的种子培养液，按体积百分比为3‑5%的接种量接种于发酵培养基中，在转速为120‑200rpm，温度为25‑30℃的条件下，获得成品；培养过程中添加经0.22微孔滤膜过滤除菌的亚铁离子，添加后亚铁离子的浓度为0.1‑100 mM，避光培养7‑21天即可；发酵培养基的组成按质量百分比计算，包括蔗糖1‑4%、硝酸钠0.1‑0.5%、磷酸氢二钾0.05‑0.15%，七水硫酸镁0.01‑0.05%，氯化钾0.01‑0.05%，初始pH为7。