[发明专利]一种规模化连续生产海藻糖的方法在审
申请号: | 201510036540.X | 申请日: | 2015-01-20 |
公开(公告)号: | CN105039455A | 公开(公告)日: | 2015-11-11 |
发明(设计)人: | 刘建龙;刘原;秦韦子 | 申请(专利权)人: | 山东师范大学;济南博联生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P19/12 | 分类号: | C12P19/12;C12R1/19 |
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地址: | 250014 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供了一种规模化连续生产海藻糖的方法,所述方法如下:(1)PCS细胞支持物固定于5m3机械通风式发酵罐搅拌轴上形成反应器;(2)接种大肠杆菌基因工程菌于反应器,培养得到产海藻糖酶细胞固定于PCS细胞支持物上即为固定化细胞生物反应器;(3)添加1.0g/L~1.5g/L硫酸粘杆菌素改变固定化细胞通透性,以及25%麦芽糖营养液,经由固定化细胞生物反应器发酵得到高产量的海藻糖。本发明立足于中试发酵水平,实现了低成本、短周期、高转化的连续操作,具有很强的社会竞争力和经济意义,为大规模生产海藻糖提供较为切实可行的途径。 | ||
搜索关键词: | 一种 规模化 连续生产 海藻 方法 | ||
【主权项】:
一种规模化连续生产海藻糖的方法,依次包括以下步骤:(1)将大肠杆菌基因工程菌接种于种子培养基的茄形瓶中培养,培养条件为35℃,20h;(2)将步骤(1)中培养好的菌苔均配成菌恳液,合瓶收集,接种反应器中培养,培养条件为35℃,200rpm,0.04MPa~0.06MPa,测得OD600为0.8~1.0时向发酵液中添加终浓度0.8mmoL/L~1.2mmoL/L IPTG,诱导酶8h;(3)在步骤(2)的发酵液中添加1.0g/L~1.5g/L硫酸粘杆菌素处理1h~2h,终止发酵,用空气将发酵液压出;(4)向固定化细胞反应器中添加麦芽糖营养液进行催化,催化条件为25℃,120rpm~150rpm,催化时间20h;(5)将步骤(4)中反应液压出进行分离干燥即得到海藻糖产品,继续向固定化细胞生物反应器添加麦芽糖营养液,重复操作。
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