[发明专利]一种快速酶解糖化白蛋白的方法有效
申请号: | 201510038246.2 | 申请日: | 2015-01-26 |
公开(公告)号: | CN104614459A | 公开(公告)日: | 2015-05-13 |
发明(设计)人: | 连国军 | 申请(专利权)人: | 温州医科大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 四川君士达律师事务所 51216 | 代理人: | 芶忠义 |
地址: | 325000 浙江省温州市茶*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种快速酶解糖化白蛋白的方法,其通过以下步骤完成:1)配制含有离子液体、蛋白变性剂、蛋白酶K、CaCl2、聚乙二醇6000、TritonX-100、叠氮钠的pH7.5-8.5Tris-HCl缓冲液;2)加入用HPLC法准确定值的糖化白蛋白样品液,反应一段时间;3)向步骤(2)所得的溶液中加入EDTA·2Na溶液,终止酶解反应;4)用HPLC法测定步骤(3)所得溶液中糖化白蛋白浓度,计算糖化白蛋白酶解率。按该法进行糖化白蛋白样品的酶解,可实现在180-600秒内将300-900μmol/L的糖化白蛋白快速酶解,特别适合FAOD法测定糖化白蛋白的方法学及测定试剂开发。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 糖化 白蛋白 方法 | ||
【主权项】:
一种快速酶解糖化白蛋白的方法,其特征在于:所述方法的具体步骤如下:(1)配制含有离子液体、蛋白变性剂、蛋白酶K、CaCl2、聚乙二醇6000、TritonX‑100、叠氮钠的pH7.5‑8.5Tris‑HCl缓冲液;(2)加入用HPLC法准确定值的糖化白蛋白样品液,在35‑40℃水浴中反应180‑600秒;(3)向步骤(2)所得的溶液中加入EDTA·2Na溶液,终止酶解反应;(4)用HPLC法测定步骤(3)所得溶液中糖化白蛋白浓度,计算糖化白蛋白酶解率。
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