[发明专利]一种固定化纤维素酶制备的方法

摘要

本发明涉及一种固定化纤维素酶制备的方法。由于游离酶混溶在反应体系中不仅不易分离回收，难以反复或连续使用，因此，将游离的纤维素酶进行固定化。将醋酸纤维素酶固定在不同孔径的聚丙烯复合膜上，通过电镜扫描观察酶固定在复合膜的效果，选出最佳孔径的聚丙烯复合膜，将选出的最佳复合酶膜固定在辊上。本发明对游离的纤维素酶进行固定化的条件选择戊二醛浓度为0.45~0.55%时，固定化温度48~49℃，选择固定化pH为3.9~4.0，交联时间为3~4h，吸附时间为3.0~3.1h，纤维素酶浓度为1.0~2.0%。测定游离纤维素酶的活力为5.103U/cm²，将固定化纤维素酶辊连续碾压大豆胚片24h，结果酶活力仍保持在80%左右，得到的固定化纤维素酶活力为4.732U/cm²。

主权项

一种固定化纤维素酶制备的方法，其特征在于将纤维素酶进行固定化通过以下步骤实现：一、复合膜的制备：将5g醋酸纤维素溶于100mL丙酮中，待溶解完全成均一的膜液后，取实验前制备好的聚丙烯膜浸于溶有醋酸纤维素的丙酮溶液中，自然成膜，以去离子水冲洗醋酸纤维素/聚丙烯复合膜数次干燥备用；二、酶的固定化：将酶液浓度为0.5~2.5%的纤维素酶和磷酸氢二钠‑磷酸二氢钾缓冲液在pH为2~6条件下混合，并加入醋酸纤维素/聚丙烯复合膜，在35~75℃的温度搅拌1~5h后，再加入0.35~0.55%的戊二醛进行交联反应1~5h，取出酶膜缠绕在圆柱体的表面上制得固定化纤维素酶辊；三、测定固定化酶相对活力：纤维素酶的活力为5.103 U/cm²，将固定化纤维素酶辊连续碾压大豆胚片24h，结果酶活力仍保持在80%左右，得到的固定化纤维素酶酶活力为4.732U/cm²。