[发明专利]一株高效脱氮除磷的反硝化聚磷菌及其应用

摘要

本发明涉及一株高效脱氮除磷的反硝化聚磷菌及其应用，属于环境微生物学领域。该菌株命名为Klebsiella sp.N14，属于克雷伯氏菌属，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.10290。该菌株为革兰氏阴性菌，无芽孢，有厚荚膜，粗短杆状，菌落呈奶白色，中凸，边缘整齐，表面湿润，透明，有光泽。该菌株具有同步脱氮除磷功能，可用于污水生物处理工艺，在含氮磷污水中好氧培养24h后，除磷率为81.79％，脱氮率为85.94％。该菌株反硝化的最终产物鉴定为N₂，具有完全反硝化能力，使用该菌株处理含氮磷污水时，能够将水体中硝酸盐氮、亚硝酸盐氮等无机氮直接还原为无害的氮气排出水体，效果突出，成本低，无二次污染。

主权项

1.一株高效脱氮除磷的反硝化聚磷菌处理污水的方法，其特征在于，所述的反硝化聚磷菌菌株16S rDNA核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，属于克雷伯氏菌属，命名为Klebsiellasp.N14，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2015年1月8号，保藏编号为CGMCC No.10290；所述菌株经鉴定为革兰氏阴性菌，无芽孢，有厚荚膜，有运动性，能水解淀粉，能利用柠檬酸盐，过氧化氢酶、硝酸盐还原实验呈阳性；菌落呈奶白色，中间凸起，边缘整齐、光滑，表面湿润，透明，有光泽，易挑起；显微镜下观察多数单个排列，粗短杆状，大小为0.5µm×1.0µm；具体包括以下步骤：①使用前用LB培养基活化菌株：挑取1环上述Klebsiellasp.N14接种于10mL新鲜富集培养基，在pH为8、温度为30℃条件下培养24h，转接种于200mL新鲜富集培养基，恒温培养48h，即可获得菌悬液；②取活化后的菌悬液接种于待处理的含氮磷污水中，菌悬液接种量为污水体积的5%，调整OD600=0.1±0.001，在pH为8、温度为30℃条件下摇床震荡好氧培养，震荡频率为140r/min；③分别于0、4、8、12、16、20、24h取待测水样，再将水样离心取上清液，检测上清液中PO43--P、NO3--N、NO2--N的浓度变化，检测方法为：PO43--P，钼锑抗分光光度法；NO3--N，酚二磺酸分光光度法；NO2--N，α-萘胺分光光度法。