[发明专利]一种胚源性鸡传染性支气管炎病毒的纯化方法有效
| 申请号： | 201510049732.4 | 申请日： | 2015-01-30 |
| 公开（公告）号： | CN104762270A | 公开（公告）日： | 2015-07-08 |
| 发明（设计）人： | 徐家华;陈瑞爱;蒋春英;张东霞;王新秋 | 申请（专利权）人： | 肇庆大华农生物药品有限公司;广东大华农动物保健品股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/02 | 分类号： | C12N7/02;A61K39/215;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人： | 罗伟添 |
| 地址： | 526238 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎病毒的纯化方法，该纯化方法采用普通鸡胚培养鸡传染性支气管炎病毒，通过依次离心、超滤浓缩、分子筛层析、超滤相结合的方法，能有效去除胚源性鸡传染性支气管炎病毒抗原中杂蛋白，病毒回收率高，且不影响鸡传染性支气管炎的活性，通过该纯化方法纯化后的鸡传染性支气管炎病毒可直接用于制备鸡传染性支气管炎病毒疫苗。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 胚源性鸡 传染性 支气管炎 病毒 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种胚源性鸡传染性支气管炎病毒的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：1)接种：对普通受精鸡胚接种鸡传染性支气管炎病毒；2)培养：37℃培养48‑96h，鸡胚在2‑8℃下冷冻8‑16h，收集鸡胚中尿囊液；3)离心：尿囊液采用4000‑6000rpm的速度离心10‑50min；4)超滤：步骤3)获得的离心液采用滤膜孔径为30‑500KDa的超滤膜进行过滤浓缩至离心液原体积的20％‑50％；5)层析：采用分子筛填料装柱至柱高为30‑120cm，经超滤的样品以填料体积的5‑20％上样，用PBS缓冲液进行洗脱层析，收集第一个蛋白质峰的洗脱液即为传染性支气管炎病毒；6)超滤：步骤5)得到的传染性支气管炎病毒的洗脱液采用滤膜孔径为30‑500KDa的超滤膜进行过滤浓缩至洗脱液原体积的20％‑50％。
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