[发明专利]以小球藻生产生物柴油的方法

摘要

本发明公开一种以小球藻生产生物柴油的方法，步骤包括：(1)种子培养；(2)种子收集；(3)光自养培养；(4)微藻采收；(5)油脂提取；本发明以普通小球藻为藻种，采用较温和的光照和光质、充足的营养及适宜的氮磷比、和适宜的温度等条件，可以促进小球藻细胞的快速生长、油脂的积累和油脂品质的稳定和改善。

主权项

一种以小球藻生产生物柴油的方法，其特征在于，其步骤包括：1)将无菌小球藻种子接种于密闭的光生物反应器中进行扩大再培养；光源为LED灯或荧光灯，光照强度为8‑10Klux，光质为白光；种子培养基成分为：海盐24‑34g/L，CH₃COONa 0.3‑0.5g/L，NaNO₃200‑300mg/L，NaH₂PO₄50‑100mg/L，Na₂EDTA 10mg/L，FeSO₄·7H₂O 2.5‑5.0mg/L，维生素B10.006‑0.06mg/L，维生素B20.00005‑0.0005mg/L；培养初始pH为6.0‑7.5，通气强度为0.2‑0.7VVM，CO₂浓度为0‑0.5％，培养温度为23‑26℃，培养3‑5天，直到细胞生长到对数期；2)对步骤1)产出的小球藻种子进行收集；3)在开放式光生物反应器中对步骤2)收集的小球藻种子进行光自养培养；光源为荧光灯或LED灯，光质为白光或蓝光，光照强度为8‑10Klux；光自养培养基成分为：海盐28‑34g/L，NaNO₃350‑550mg/L，NaH₂PO₄30‑80mg/L，Na₂EDTA 10‑30mg/L，FeSO₄·7H₂O 2.5‑5.0mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.01mg/L，ZnSO₄·7H₂O 0.03‑0.06mg/L，CoCl₂·6H₂O 0.02‑0.05mg/L，MnCl₂·4H₂O0.2‑0.6mg/L，Na₂Mo₄·2H₂O 0.1‑0.3mg/L，维生素B10.006‑0.06mg/L，维生素B20.00005‑0.0005mg/L，生物素0.00005‑0.0005mg/L，其中氮磷元素之比为15‑25；培养初始pH为6.0‑7.5，通气强度为0.5‑1.0VVM，CO₂浓度为1.0‑2.0％，培养温度为22‑30℃；4)对步骤3)生产的小球藻进行采收；5)破碎步骤4)所得到的小球藻细胞，进行油脂提取。