[发明专利]一种用于鉴定水稻育性恢复基因的特异引物组合以及应用

摘要

本发明提供了一种鉴定水稻育性恢复基因的特异引物组合，适用于各种水稻三系包台型，红莲型恢复系的筛选和鉴定。该方法包括下列步骤，首先是育性恢复基因特异分子标记PCR引物设计；其次是DNA的提取；第三是标准PCR扩增体系的建立；第四是扩增DNA片段检测分析。本发明方法简便，操作方便，该方法以水稻育性恢复基因分子标记为基础，快速、准确、可靠地通过实验室筛选水稻恢复系种质材料，使三系配套选育更具有目的性和针对性，克服了传统育种方法的盲目性和低效、工作量大的缺陷，提高了三系，两系杂交育种的选育效率。

主权项

一种基于引物组合的快速鉴定水稻育性恢复基因的方法，其特征在于步骤如下：所述引物组合包括正向引物F和反向引物R，其中正向引物F的基因序列如SEQ ID NO.1所示：5’CCA TGA CAA GAG GAC CAG 3’，反向引物R的基因序列如SEQ ID NO.2所示：5’GTT ATA AGT GAC GAC ATC CG 3’；首先提取目标植物基因组，然后以基因组为模板，用上述的引物组合进行PCR扩增，最后针对扩增DNA片段进行检测，检测方法如下：其次是扩增片段在1.0％浓度的琼脂糖胶上电泳，用DNA提取回收盒纯化回收，克隆测序；然后对阳性育性恢复基因的鉴定：(1)以水稻品种9311以及粤泰A作为对照，其中对照材料9311有一条762bp的扩增条带，粤泰A具有424bp的条带；(2)与9311具有相同的扩增条带的材料就具有该育性恢复基因，与粤泰A一致的就无该育性恢复基因。