[发明专利]一种体外构建具有抗流动剪切力和抗血小板凝集功能的血管内皮层的方法

摘要

本发明提供了一种体外构建具有抗流动剪切和抗血小板凝集功能的血管内皮层的方法，通过对人造血管内腔表面的血管内皮细胞施加缓慢地，逐渐增加的流动剪切力，使血管内皮细胞逐步适应剪切力环境，该方法主要包含以下步骤：将内腔表面长满血管内皮细胞的人造血管连接到剪切力诱导系统的管路中；启动剪切力诱导系统的液体驱动泵，使内皮细胞受到的初始剪切力为0-2dyne/cm²；每隔一段时间，调节液体驱动泵，使内皮细胞受到的剪切力比前一时间段提高一定比例；直到内皮细胞受到的剪切力达到移植部位动脉血管内皮细胞所承受的平均或峰值剪切力水平为止；将剪切力保持在移植部位动脉血管内皮细胞所承受的平均或峰值剪切力水平，培养内皮细胞24-72小时。

主权项

体外构建具有抗流动剪切和抗血小板凝集功能的血管内皮层的方法，其特征在于所述的方法包含以下步骤：(1)在人造血管内腔表面接种血管内皮细胞；(2)将接种了血管内皮细胞的人造血管培养24‑48小时，从而使血管内皮细胞长满人造血管内腔表面；(3)将长满血管内皮细胞的人造血管两端连接到充满了培养液的剪切力诱导系统的管路中，从而使人造血管和剪切力诱导系统的管路构成一个封闭的回路；(4)启动剪切力诱导系统的液体驱动泵，设定初始流速，从而使流经人造血管内腔的培养液对血管内皮细胞的初始剪切力为0‑2dyne/cm²；(5)在剪切力施加一段时间后，调节液体驱动泵使培养液的流速比前一时间段流速提高一定比例，从而使人造血管内腔的内皮细胞受到的剪切力比前一时间段提高一定比例；所述的剪切力施加一段时间，是施加剪切力1‑4小时；所述的调节液体驱动泵使培养液的流速比前一时间段流速提高一定比例，是培养液的流速比前一时间段流速提高5‑20％之间的一个固定值；所述的使人造血管内腔的内皮细胞受到的剪切力比前一时间段提高一定比例，是流动剪切力比前一时间段流速提高5‑20％之间的一个固定值；(6)此后每隔一段时间，调节液体驱动泵使培养液的流速比前一时间段流速提高一定比例，从而使人造血管内腔的内皮细胞受到的剪切力比前一时间段提高一定比例；直到人造血管内腔的内皮细胞受到的剪切力达到移植部位动脉血管内皮细胞所承受的平均剪切力或剪切力峰值水平为止；所述的此后每隔一段时间，是每隔1‑4小时；所述的调节液体驱动泵使培养液的流速比前一时间段流速提高一定比例，是培养液的流速比前一时间段流速提高5‑20％之间的一个固定值；所述的使人造血管内腔的内皮细胞受到的剪切力比前一时间段提高一定比例，是流动剪切力比前一时间段流速提高5‑20％之间的一个固定值；(7)保持人造血管内腔的血管内皮细胞受到的平均剪切力在移植部位动脉血管内皮细胞所承受的平均剪切力或剪切力峰值水平，继续培养24‑72小时；(8)结束剪切力诱导，取下人造血管，用于后续生理指标检测及血管移植。