[发明专利]一种制备高支化多糖‑丝素水凝胶支架的方法

摘要

本发明公开了一种制备高支化多糖‑丝素水凝胶支架的方法，属于天然高分子材料技术领域。制备方法采用将虎奶菇高支化多糖分散在NaOH和异丙醇中，与氯乙酸在60 ℃温度下经反应、冷却、中和、透析、冷冻干燥得羧甲基化高支化多糖，将所得的羧甲基化多糖溶解在pH=7.4的磷酸缓冲盐溶液中，用1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N‑羟基琥珀酰亚胺活化15 min～4 h，在4～37 ℃温度下与丝素溶液交联反应6～48 h后，得高支化多糖‑丝素水凝胶支架。本发明方法操作简便，所用原材料来源丰富，而且所制得的支架材料具有药物可控释放性，力学性能良好且兼有生物相容性，该高支化多糖‑丝素水凝胶支架可用于制备人工组织支架。

主权项

一种制备高支化多糖‑丝素水凝胶支架的方法，其特征在于：所述的制备方法包括以下步骤：a将干燥的虎奶菇菌核粉碎，依次用乙酸乙酯、丙酮进行索氏提取去除脂肪，然后将去脂肪后的虎奶菇菌核浸泡在生理盐水中，在高压120℃温度下提取，离心得提取液，冷却提取液后再离心且收集残渣；残渣用去离子水离心清洗且冷冻干燥得到高支化虎奶菇多糖；b在冰水浴条件下，将虎奶菇高支化多糖分散在20wt％NaOH和异丙醇混合溶液中，搅拌2h后形成虎奶菇高支化多糖‑NaOH‑异丙醇均匀悬浮液，其中虎奶菇高支化多糖与异丙醇的质量体积比为：60:1，20wt％NaOH与异丙醇的体积比为1:2.5；c将氯乙酸溶于异丙醇中，并缓缓逐滴到经b步骤得到的虎奶菇高支化多糖‑NaOH‑异丙醇均匀悬浮液中，在60℃温度下反应3h，停止反应后冷却至室温，然后用0.5M乙酸溶液中和至pH＝7，将经上述反应所得的产物用蒸馏水透析，旋转蒸发浓缩，冷冻干燥即得羧甲基化高支化多糖，其中，高支化多糖羟基与氯乙酸的摩尔比为1:5，氯乙酸与异丙醇的质量体积比为2.63:5；d将蚕丝在0.5wt％的Na2CO3水溶液中煮沸40min，用去离子水清洗甩干后得到丝素蛋白纤维，真空干燥，干燥温度为50℃，干燥时间为12h，将干燥后的丝素蛋白纤维磨制成平均粒径3mm的丝素粉体；e将经d步骤得到的平均粒径3mm的丝素粉体分散在9.3mol/mL的LiBr水溶液中，在60℃温度下搅拌6h配成丝素溶液，所得丝素溶液的质量体积浓度为5％；f将经e步骤得到的丝素溶液在去离子水中透析3～7天，去除丝素溶液中的LiBr，然后在质量体积浓度为20％的聚乙二醇水溶液中透析，浓缩得质量体积浓度为15％的丝素溶液；g将经c步骤得到的羧甲基化高支化多糖溶解在pH＝7.4的磷酸缓冲盐溶液中得20～60％的溶液，将100mg/mL的1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐和150mg/mL的N‑羟基琥珀酰亚胺加入到上述溶液中，搅拌15min～4h得活化体系，将活化体系加入到经f步骤得到浓度为15％的丝素溶液中，在4～37℃温度下交联反应6～48h，得高支化多糖‑丝素水凝胶支架。