[发明专利]一种长白仔猪骨髓间充质干细胞永生系的建立方法有效
| 申请号： | 201510065393.9 | 申请日： | 2015-02-06 |
| 公开（公告）号： | CN105018430B | 公开（公告）日： | 2018-08-31 |
| 发明（设计）人： | 张守全;白银山;冯美莹;卫恒习;李莉 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867;A61K35/28;A61K39/00;A61P43/00 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 龚燮英 |
| 地址： | 510642 广东省广州市天*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种长白仔猪骨髓间充质干细胞永生系的建立方法，包括步骤：取长白小公猪的骨髓细胞，培养液培养20‑28h后更换新鲜培养液，继续培养，传代至获得细胞形态均一的F3代的长白仔猪bMSCs；利用携带LargeT慢病毒液侵染F3代的长白仔猪bMSCs，细胞筛选，传代至得到稳定表达Egfp的细胞株；将稳定表达Egfp的细胞株，传代50代以上，经细胞生物学分析检测，获得长白仔猪骨髓间充质干细胞永生系。本发明获得了能支持猪bMSCs稳定培养的系统，促使细胞体外快速稳定增殖，并维持原代的生物学特征，证明得到了永生的长白仔猪bMSCs，可以深入研究猪bMSCs生物学性质和应用于药物或疫苗研发。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 仔猪 骨髓 间充质 干细胞 永生 建立 方法 | ||
【主权项】：
1.一种长白仔猪骨髓间充质干细胞永生系建立用的培养液，其特征在于，所述培养液为：添加了12～18％FBS，50～60μMβ‑巯基乙醇，0.8～1.2％ITS，0.8～1.2％L‑谷氨酰胺，0.8～1.2％核苷酸，0.8～1.2％非必需氨基酸，0.8～1.2％必需氨基酸，45～55μg/mL维生素C，5～15ng/mL表皮生长因子，5～15ng/mL碱性成纤维生长因子和0.8～1.2％双抗的MEM培养基。
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