[发明专利]用于HIV检测的酸性处理剂、样本预处理方法、试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种用于HIV检测的酸性处理剂、样本预处理方法、试剂盒及检测方法，属于体外诊断检测技术领域。该酸性处理剂主要由浓度为0.1‑1.0mol/L的有机酸溶液和浓度为0.01‑0.1mol/L的无机酸溶液混合而成，或为浓度为0.1‑1.2mol/L的有机酸溶液，该酸性处理剂的pH值为2.5‑4.5。采用上述的酸性处理剂，可以很好的分离样本中的p24抗原和p24抗体。采用上述酸性处理剂的HIV检测试剂盒及样本预处理方法和检测方法，具有灵敏度高的优点。 1

主权项

1.一种HIV检测试剂盒，其特征在于，包括以下组分：

1）酸性处理剂：主要由浓度为0.1‑1.0 mol/L的有机酸溶液和浓度为0.01‑0.1 mol/L的无机酸溶液混合而成，该酸性处理剂的pH值为2.5‑4.5；其中，所述无机酸为一元无机酸，所述有机酸和一元无机酸的摩尔比为1‑20:1；或所述无机酸为二元无机酸，所述有机酸和二元无机酸的摩尔比为0.5‑10:1；或所述无机酸为三元无机酸，所述有机酸和三元无机酸的摩尔比为0.3‑6.6:1；

2）磁性微球体系：包括直接连接或间接连接HIV重组抗原1的磁性微球，和/或直接连接或间接连接抗HIV抗体A的磁性微球；

3）标记物体系：包括相应的直接连接或间接连接标记示踪物的HIV重组抗原2，和/或直接连接或间接连接标记示踪物的抗HIV抗体B；

所述HIV重组抗原1 和HIV重组抗原2与待测抗体结合的位点互不相同，所述抗HIV抗体A和抗HIV抗体B与待测抗原结合的位点互不相同。

2.根据权利要求1所述的HIV检测试剂盒，其特征在于，所述有机酸和一元无机酸的摩尔比为7‑13:1；或所述有机酸和二元无机酸的摩尔比为3.5‑6.5:1；或所述有机酸和三元无机酸的摩尔比为2.3‑4.3:1。

3.根据权利要求1所述的HIV检测试剂盒，其特征在于，所述有机酸为乙酸、苯甲酸、乙二酸、丁二酸、苹果酸、柠檬酸、水杨酸中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的HIV检测试剂盒，其特征在于，还包括以下组份：

4）免疫干扰物结合剂：包括结合剂和辅助成分；所述结合剂为新生牛血清、羊血清、马血清、牛血清白蛋白、羊抗人IgG/IgM、兔抗人IgG/IgM、鼠抗人IgG/IgM中的至少一种；所述辅助成分为甘油、乙二醇、聚乙二醇、蔗糖、氯化钠、乙二胺四乙酸盐中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的HIV检测试剂盒，其特征在于，所述结合剂的浓度为0.1‑20 g/L，所述辅助成分的浓度为0.2‑10 g/L。

6.根据权利要求1所述的HIV检测试剂盒，其特征在于，所述HIV重组抗原为HIV 1+2型重组抗原，所述抗HIV抗体为抗HIV p24抗体。

7.根据权利要求1所述的HIV检测试剂盒，其特征在于，所述标记示踪物为发光标记物，选自：金刚烷，鲁米诺及其衍生物，异鲁米诺及其衍生物，吖啶酯；

或所述标记示踪物为化学发光催化剂，选自：碱性磷酸酶，过氧化物酶。

8.根据权利要求1所述的HIV检测试剂盒，其特征在于，所述2）磁性微球体系中，所述间接连接HIV重组抗原1的磁性微球由包被抗异硫氰酸荧光素抗体的磁性微球，和标记异硫氰酸荧光素的HIV重组抗原1组成；或所述间接连接HIV重组抗原1的磁性微球由包被链霉亲和素的磁性微球，和标记生物素的HIV重组抗原1组成；或所述间接连接HIV重组抗原1的磁性微球由包被抗标签蛋白抗体的磁性微球，和具有标签蛋白的HIV重组抗原1组成；

所述间接连接抗HIV抗体A的磁性微球由包被抗异硫氰酸荧光素抗体的磁性微球，和标记异硫氰酸荧光素的抗HIV抗体A组成；或所述间接连接抗HIV抗体A的磁性微球由包被链霉亲和素的磁性微球，和标记生物素的抗HIV抗体A组成；或所述间接连接抗HIV抗体A的磁性微球由包被抗标签蛋白抗体的磁性微球，和具有标签蛋白的抗HIV抗体A组成。

9.根据权利要求1所述的HIV检测试剂盒，其特征在于，所述3）标记物体系中，所述间接连接标记示踪物的HIV重组抗原2由标记生物素的HIV重组抗原2，和标记链霉亲和素的标记示踪物组成；或所述间接连接标记示踪物的HIV重组抗原2由标记异硫氰酸荧光素的HIV重组抗原2，和标记抗异硫氰酸荧光素抗体的标记示踪物组成；或所述间接连接标记示踪物的HIV重组抗原2由具有标签蛋白的HIV重组抗原2，和标记抗标签蛋白抗体的标记示踪物组成；

所述间接连接标记示踪物的抗HIV抗体B由标记生物素的抗HIV抗体B，和标记链霉亲和素的标记示踪物组成；或所述间接连接标记示踪物的抗HIV抗体B由标记异硫氰酸荧光素的抗HIV抗体B，和标记抗异硫氰酸荧光素抗体的标记示踪物组成；或所述间接连接标记示踪物的抗HIV抗体B由具有标签蛋白的抗HIV抗体B，和标记抗标签蛋白抗体的标记示踪物组成。

10.权利要求1‑9任一项所述的HIV检测试剂盒在化学发光分析仪上的应用。

11.一种HIV待测样本的预处理方法，其特征在于，采用权利要求1‑9任一项所述的HIV检测试剂盒，将待测样本与所述酸性处理剂按照0.5‑5:1的体积比混合，得到待测溶液。

12.根据权利要求11所述的HIV待测样本的预处理方法，其特征在于，将待测样本与所述酸性处理剂混合后，还将待测溶液在20‑60℃下温育1‑30分钟。