[发明专利]一种小麦种子高分子量谷蛋白亚基检测样品的制备方法有效
| 申请号： | 201510073536.0 | 申请日： | 2015-02-11 |
| 公开（公告）号： | CN104655464B | 公开（公告）日： | 2017-06-23 |
| 发明（设计）人： | 张平平;马鸿翔;姚金保;张鹏;杨丹;王化敦 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司32200 | 代理人： | 张素卿 |
| 地址： | 210014 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种小麦种子高分子量谷蛋白亚基检测所需样品的制备方法，属于生物化学领域。在小麦种子无胚端切取其体积的1/4~1/5，置于单孔容积为200 uL的96孔PCR扩增用微孔板中，并在每个微孔中放入1粒直径2 mm的钢珠。随后在微孔板中加入40 uL浸泡缓冲液静置过夜，再加入120 uL提取缓冲液，经高通量研磨器研磨后，在60℃的烘箱静置30 min，期间分2次，分别漩涡震荡1 min。微孔板经离心后所得上清液为小麦高分子量谷蛋白亚基检测所需样本。该提取方法通量高，适用于大规模的小麦种子高分子量谷蛋白亚基检测中的样品制备。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 小麦 种子 分子量 谷蛋白 检测 样品 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种小麦种子高分子量谷蛋白亚基检测样品的制备方法，其特征在于：在96孔微孔板中一步提取，96孔微孔板为实验室通用的容积为200uL的PCR扩增用微孔板，该微孔板配有塑料联排孔盖和每孔1粒直径2mm的钢珠，其步骤包括：在小麦种子无胚端切取其体积的1/4～1/5，置于200uL的96孔PCR扩增用微孔板中，并在每个微孔中放入1粒直径2mm的钢珠；随后在微孔板中加入40uL浸泡缓冲液静置过夜，再加入120uL提取缓冲液，经高通量研磨器研磨后，在60℃的烘箱静置，期间每静置14min，漩涡震荡一次1min，两次共30min，微孔板经离心后所得上清液为小麦高分子量谷蛋白亚基检测所需样本；其中浸泡缓冲液：25％正丙醇+0.04M Tris‑HCl PH8.0；提取缓冲液：25％正丙醇+0.04M Tris‑HCl PH8.0+3.0％SDS+1.3％DTT+2.0％4‑VP；碾磨使用高通量组织碾磨仪，碾磨频率为30次/s，碾磨时间为2min；微孔板离心条件为4000rpm×15min。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江苏省农业科学院，未经江苏省农业科学院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201510073536.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
