[发明专利]一种油棕嫩叶微创伤取材及其愈伤组织诱导方法

摘要

本发明属植物组织培养技术领域，涉及一种油棕嫩叶微创伤取材及其愈伤组织诱导方法，是在成龄油棕距生长点纵向往上部位凿洞，取出其中幼嫩叶片，消毒后切成小片，接种到愈伤组织诱导培养基上进行培养，培养条件：暗培养，培养温度26～30℃；经45～60天诱导培养，开始出现愈伤组织。本发明工艺简单，操作方便，通过在生长点以上凿洞采集幼嫩叶片，对外植体母树伤害极小，采后恢复快，叶片处理后接种到愈伤组织诱导培养基上，可获得诱导率较高且质地良好愈伤组织，为高效的油棕体细胞胚再生植株技术体系奠定良好的基础，对稀有油棕优异种质资源保护及其开发利用具有现实意义。

主权项

一种油棕嫩叶微创伤取材及其愈伤组织诱导方法，其特征在于，其步骤如下：1)、叶片外植体材料采集：在成龄油棕距生长点纵向往上部位凿洞，取出其中幼嫩叶片；2)、叶片外植体材料消毒：将获得的叶片，在无菌条件下，修除边角，切成适合大小，置于0.1％升汞中浸泡3～12min，然后用无菌水冲洗4～5次，消毒后备用；3)、将经消毒的叶片切成小片，接种到愈伤组织诱导培养基上进行培养，培养条件：暗培养，培养温度26～30℃；经45～60天诱导培养，开始出现愈伤组织；所述愈伤组织诱导培养基是以改良的WPM为基础培养基，并添加5～15mg/L TDZ、8～24mg/L麦草畏、2000mg/L活性炭、6g/L琼脂、0.5～5mg/L泛酸钙、0.05～0.5mg/L生物素、100～1000mg/L水解酪蛋白，培养基灭菌前调其pH5.6；所述改良的WPM是以WPM培养基为基础，在其它成分不变的条件下调整其中盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、蔗糖含量分别为：10～15mg/L、10～15mg/L、45g/L。