[发明专利]楸树组培苗生根培养方法

摘要

本发明公开了一种楸树组培苗生根培养方法，它按照以下步骤顺序进行(1)楸树无菌苗的获取；(2)无菌苗的继代；(3)楸树组培苗生根培养；和(4)炼苗与移栽，采用本发明所提供的楸树组培苗生根培养方法，控制扩繁比例为13－3.5，控制苗的株高为2.5－4cm后在进行生根培养，生根的比例达90％以上；降低了生产成本，在楸树组培苗生根培养的过程中无菌苗的获取和继代培养使用的是同一种培养基，节省了操作步骤和生产成本，更适于工业化生产。为实验林木组培产业化，简化产业化流程，缩减步骤，控制人工，有利于成本控制，进而促进木本植物组织培养的产业化。本发明适用于楸树组培苗的生根培养。

主权项

一种楸树组培苗生根培养方法，其特征在于它按照以下步骤顺序进行：(1)楸树无菌苗的获取选取带芽点的健壮枝条于室内进行水培，待新芽萌发出来后切割成2～3cm长的顶芽或带腋芽的茎段，剪去叶片留3～5mm叶柄，用75％酒精擦拭外植体表面，用洗衣粉水浸泡2min，再置于流水下冲洗0.5～1h；在超净工作台上，用0.05％的升汞处理6～9min，用无菌水冲洗5次，接种至培养基A中，每瓶接种2株，获得楸树无菌苗；(2)无菌苗的继代选取生长周期为26～30天，生长健壮、叶片浓绿的楸树无菌苗，利用顶芽、茎段及基部愈伤组织含有的小芽进行繁殖，其中顶芽高0.8～1.4cm、茎段高0.5～1cm，至少含一个腋芽，基部愈伤组织含2～4个小芽，继续转接至培养基A中，培养26～30天后，即可得用于生根的楸树组培苗进行生根培养或者用于继续继代的楸树组培苗；培养基A包括：以MS为基础培养基，添加浓度为30g/L的蔗糖，浓度为5.8g/L的琼脂，浓度为0.05～0.2mg/L的6‑BA、浓度为0.01～0.05mg/L的TDZ，调节pH为5.8～6.0；(3)楸树组培苗生根培养选取步骤(2)继代培养中高度为2.5～4cm的楸树组培苗，保留3片以上展开的大叶，基部叶柄贴茎杆切除，同时将展开的腋芽切除，切口以下留出1mm的茎杆，接种至生根培养基中，切口部位没入培养基B中，培养25～28天，即得楸树生根苗；所述培养基B包括：以MS1/2为基础培养基，添加浓度为0.3～1.5mg/L的IBA，15～30g/L蔗糖和浓度为5.8g/L的琼脂，pH调节至5.5～5.8；(4)炼苗与移栽将楸树生根苗根系上的培养基洗净，种植于含有营养基C的营养杯或穴盘中，湿度为80～90％，待新根及新叶发出后接膜通风，培养45～60天，即得楸树大棚生根苗；所述营养基C包括两层，其中下层2/3容量为体积比为菜园土：珍珠岩：蛭石：草炭＝2:2:1:1混合的营养基,上层1/3为体积比为蛭石：珍珠岩＝1:1的营养基。