[发明专利]特异靶向巨噬细胞的蛋白质传递系统

摘要

本发明公开了一种基于酵母中空β-葡聚糖外壳包裹GMP-BSA的蛋白质靶向巨噬细胞的传递系统。该系统利用壳聚糖(CS)、三聚磷酸盐(TPP)、海藻酸钠与BSA靠静电吸附作用形成的致密层将BSA包被在酵母壳中。该技术制备的GMP-BSA颗粒在体外实验中表现出非常好的蛋白释放行为，并能避免蛋白质丢失。该颗粒高特意靶向巨噬细胞，如Raw 264.7细胞，原代BMDM细胞(原代骨髓巨噬细胞)和腹腔巨噬细胞(PEMs)，而该颗粒并没有被诸如NIH3T3、AD293、HeLa及Caco-2等非巨噬肿瘤细胞和血液中的中性粒细胞吞噬。巨噬细胞在各种疾病的发病机理中起很重要的作用，是非常重要的潜在靶点。此外，巨噬细胞是关键的抗原传递细胞，且在疫苗设计中十分重要。我们认为该体系可高选择性靶向输送各种蛋白到巨噬细胞，在靶向药物给药和在巨噬细胞疫苗设计方面也有广泛的应用前景。

主权项

一种基于酵母中空β‑葡聚糖外壳包裹GMP‑BSA的新型蛋白质靶向巨噬细胞的传递系统。该系统利用壳聚糖(CS)、三聚磷酸盐(TPP)、海藻酸钠与牛血清蛋白(BSA)靠静电吸附作用形成的致密层将BSA包被在酵母壳中。制备方法为先将BSA加入到空酵母壳中，室温下孵育10‑30min，再加入低分子量CS室温下孵育2小时囊缩BSA进酵母壳。最后加入过量TPP/海藻酸钠到酵母壳中，离心收集GMP‑BSA，真空冻干得到GMP‑BSA粉末。该颗粒高选择性特意靶向输送各种蛋白巨噬细胞，如Raw264.7细胞，原代BMDM细胞(原代骨髓巨噬细胞)和腹腔巨噬细胞(PEMs)，而该颗粒并没有被诸如NIH3T3、AD293、HeLa及Caco‑2等非巨噬肿瘤细胞和血液中的中性粒细胞吞噬。