[发明专利]一种通过未受精胚珠培养诱导雌核发育获得黄瓜再生植株的方法有效
申请号: | 201510080474.6 | 申请日: | 2015-02-13 |
公开(公告)号: | CN104620988B | 公开(公告)日: | 2017-01-18 |
发明(设计)人: | 王烨;顾兴芳;张圣平;苗晗 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京知本村知识产权代理事务所11039 | 代理人: | 刘江良 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种通过未受精胚珠离体培养诱导雌核发育获得黄瓜再生植株的方法,其方法包括如下步骤取黄瓜雌花开花前的完整子房接种在以MS培养基为基础添加TDZ的预培养培养基上进行初步诱导;初步诱导后将完整子房沿中心线纵切,剥离未受精胚珠接种在含有KT和BA的IM3诱导培养基上;待胚状体分化出子叶和胚根后,转入MS培养基中继续生长、发育,获得完整的再生植株;采用根尖细胞染色体计数和流式细胞仪鉴定其倍性,成功获得单倍体和二倍体植株。本发明不仅奠定了黄瓜单倍体育种的研究基础,更为杂交选育、分子标记、遗传图谱构建和基因定位提供了技术支撑。 | ||
搜索关键词: | 一种 通过 受精 胚珠 培养 诱导 核发 获得 黄瓜 再生 植株 方法 | ||
【主权项】:
一种通过未受精胚珠离体培养诱导雌核发育获得黄瓜再生植株的方法,其特征在于包括如下步骤:(1)取黄瓜开花前的雌花的完整子房接种在以MS培养基为基础添加TDZ浓度为0.01‑0.1mg·L‑1的预培养基上进行初步诱导;(2)初步诱导完成后,取出完整子房并沿中心线纵切,剥离未受精胚珠,接种在以IM3为基础,添加0.5‐1.0mg·L‐1的KT和1.0‐4.0mg·L‐1的BA的诱导培养基上,其中诱导培养基pH5.5到5.7,IM3的成分如下:(3)待胚状体分化出子叶和胚根后,转入MS培养基中继续生长、发育,获得完整的再生植株;(4)采用根尖细胞染色体计数和流式细胞仪鉴定其倍性;所述黄瓜为欧亚杂交类型黄瓜。
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