[发明专利]人或哺乳动物正常上皮细胞的培养基、培养方法、正常上皮细胞及其应用在审
申请号: | 201510080486.9 | 申请日: | 2015-02-13 |
公开(公告)号: | CN104694460A | 公开(公告)日: | 2015-06-10 |
发明(设计)人: | 李晖;李红亮;刘红亚;王玲 | 申请(专利权)人: | 武汉大学深圳研究院 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12Q1/02 |
代理公司: | 广东知恒律师事务所 44342 | 代理人: | 柴吉峰 |
地址: | 518057 广东省深圳市南山区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种人或哺乳动物正常上皮细胞的培养基、原代分离培养、传代培养、气-液3D培养及基质胶3D培养方法,以及上述培养基、培养方法所生成的正常上皮细胞及其在毒理学评价系统中的应用,培养基成分包括:DMEM与Ham’s F-12NUTRIENT MIX按体积比3:1混合的培养基,同时添加4-6%胎牛血清、1-3nM triiodothyronine,0.4-0.65%insulin-transferrin-selenium试剂、4-6μg/ml transferrin、9-11ng/mL表皮生长因子、0.3-0.5μg/mL氢化可的松、0.5-1.5nM霍乱毒素、0.4-0.6μg/mL两性霉素B、35-45μg/mL庆大霉素、45-55nM calpeptin、35-45ng/ml重组人IL-1RA及3ug/ml重组人R-Spondin-1。发明提供的一种培养基,可用于分离培养、传代培养人或哺乳动物多种组织来源的正常上皮细胞,于体外快速增殖并建立细胞系,为正常二倍体细胞,应用于人或哺乳动物的毒理学评价系统。 | ||
搜索关键词: | 哺乳动物 正常 上皮细胞 培养基 培养 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种用于培养人或哺乳动物的正常上皮细胞的培养基,其特征在于,所述培养基成分包括:DMEM与Ham’s F‑12NUTRIENT MIX按体积比3:1混合的培养基,同时添加4‑6%胎牛血清、1‑3nM triiodothyronine,0.4‑0.65%insulin‑transferrin‑selenium试剂、4‑6μg/ml transferrin、9‑11ng/mL表皮生长因子、0.3‑0.5μg/mL氢化可的松、0.5‑1.5nM霍乱毒素、0.4‑0.6μg/mL两性霉素B、35‑45μg/mL庆大霉素、45‑55nM calpeptin、35‑45ng/ml重组人IL‑1RA及3ug/ml重组人R‑Spondin‑1。
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