[发明专利]一种从高粱外种皮中提取原花青素四聚体的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种从高粱外种皮中提取原花青素四聚体的制备方法及应用，其步骤a、将SPC混合物粉末溶于水，经乙酸乙酯萃取后，冷冻干燥；b、溶于甲醇，经滤膜过滤，上样至Toyopearl HW‑40(s)凝胶色谱柱；c、以甲醇为流动相，采用紫外‑可见分光光度计检测每管洗脱液的吸光值，合并各个洗脱级分对应的收集管内的洗脱液，真空浓缩、冷冻干燥。一种原花青素四聚体在治疗或预防龋齿药物中的应用。采用乙酸乙酯萃取，去除水溶性杂质和原花青素高聚体，提高了原花青素低聚体的纯度，使得凝胶色谱对包括原花青素四聚体在内的低聚体分离制备效果更好。通过影响变形链球菌中葡萄糖基转移酶催化活性区蛋白的结构、并破坏其活性，干预龋齿的发生。

主权项

一种从高粱外种皮中提取原花青素四聚体的方法，其步骤是：a、将经过柱层析纯化得到的原花青素混合物粉末溶于水中，加入2～4倍体积的乙酸乙酯，萃取2～4次后，收集合并的乙酸乙酯相，旋转蒸发除去乙酸乙酯，将得到的萃取物溶于水，进行冷冻干燥；b、称取2mg的高粱原花青素萃取物，溶于1～2ml的甲醇，经0.45μm的滤膜过膜，上样至Toyoearl HW‑40(s)凝胶色谱柱；c、以甲醇为流动相，流速为1.1ml/min，自动部分收集器收集条件为：管/10min，洗脱时间保持在20小时10分钟，最后用甲醇平衡色谱柱，采用紫外‑可见分光光度计分别记录每管接收液在280nm和350nm处的吸收值；d、以管数为横坐标，吸光值为纵坐标作图，根据原花青素和黄酮在紫外区的特征吸收图谱，洗脱物共分为6个组分，将每个组分对应的收集管内的洗脱液合并后经浓缩、冷冻干燥，获得一种从高粱外种皮中提取的原花青素四聚体。