[发明专利]基于核糖体展示技术的兔单克隆抗体制备方法在审
| 申请号： | 201510083087.8 | 申请日： | 2015-02-16 |
| 公开（公告）号： | CN105985964A | 公开（公告）日： | 2016-10-05 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 江苏佰润医疗科技有限公司;朱燕华 |
| 主分类号： | C12N15/13 | 分类号： | C12N15/13;C12N15/10 |
| 代理公司： | 镇江京科专利商标代理有限公司 32107 | 代理人： | 夏哲华 |
| 地址： | 212018*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种兔单克隆抗体的制备方法，其特征在于采用核糖体展示技术来制备兔单克隆抗体，即通过PCR扩增目的抗体的基因文库，同时加入启动子、核糖体结合位点和茎环，并置于有偶联转录-翻译的无细胞翻译系统中孵育，使目的抗体基因的翻译产物展示在核糖体表面，并形成“mRNA-蛋白质-核糖体”三元复合体，最后利用常规的免疫学检测技术，通过固相化的靶分子直接从三元复合体中筛选出目的核糖体，再利用RT-PCR扩增，进行下一循环的富集和扩增，最终筛选出高亲和力的目标抗体。用该方法制备兔单克隆抗体具有如下优势：一是较原有技术更方便快捷。二是筛选出的抗体可以稳定复制。三是可以实现高通量筛选而获得高亲和力的抗体。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 核糖体 展示 技术 单克隆抗体 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种兔单克隆抗体制备方法，其特征在于采用核糖体展示技术来制备兔单克隆抗体，即通过PCR扩增目的抗体的基因文库，同时加入启动子、核糖体结合位点和茎环，并置于有偶联转录‑翻译的无细胞翻译系统中孵育，使目的抗体基因的翻译产物展示在核糖体表面，并形成“mRNA‑蛋白质‑核糖体”三元复合体，最后利用常规的免疫学检测技术，通过固相化的靶分子直接从三元复合体中筛选出目的核糖体，再利用RT‑PCR扩增，进行下一循环的富集和扩增，最终筛选出高亲和力的目标抗体。
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